首页 期刊 军事医学 小鼠抗人LSECtin单克隆抗体的制备与鉴定 【正文】

小鼠抗人LSECtin单克隆抗体的制备与鉴定

作者:彭贵林; 刘静; 柳迪; 唐丽 军事科学院军事医学研究院生命组学研究所; 北京102206; 蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心(北京); 北京102206
lsectin   杂交瘤细胞   单克隆抗体   cho细胞   重组蛋白质类  

摘要:目的制备并鉴定小鼠抗人LSECtin(肝、淋巴结窦内皮细胞凝集素)单克隆抗体,为深入研究其功能奠定基础。方法利用CHO细胞制备人LSECtin-His融合蛋白,将其作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过电融合获得能产生人LSECtin单克隆抗体的杂交瘤细胞。用LSECtin重组蛋白作为检测原,筛选分泌LSECtin单克隆抗体的杂交瘤细胞株。分别通过流式检测和Western印迹实验(WB),对LSECtin单克隆抗体进行鉴定。结果获得分泌LSECtin单克隆抗体的杂交瘤细胞系。流式细胞术结果显示,共有5株抗体可特异性识别细胞表面表达的LSECtin;有2株可用于WB实验。结论获得了能应用于流式细胞术和WB实验的LSECtin单克隆抗体,为LSECtin的功能性研究奠定了基础。

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