首页 期刊 国外医学·医学地理分册 应用非变性毛细管电泳检测乙肝病毒基因型B和基因型C 【正文】

应用非变性毛细管电泳检测乙肝病毒基因型B和基因型C

作者:林长缨; 张秀春; 高培; 黎新宇; 王全意 北京市疾病预防控制中心传染病地方病控制所; 北京100013
乙型肝炎   乙肝病毒基因型   毛细管电泳   母婴阻断  

摘要:目的建立非变性毛细管电泳分离乙肝病毒特异性巢式PCR产物方法,用于乙肝病毒B基因型和C基因型判断。方法建立线性聚丙烯.聚乙二胺一TBE非变性毛细管电泳方法,分离母婴阻断失败患儿血清中乙肝病毒基因型特异性巢式PCR的扩增产物,采用表观分子量鉴定B、C基因型特异性和非特异性扩增产物。结果毛细管电泳条件为30.2cm×50μm毛细管,分离缓冲液为2%(w/v)线性聚丙烯酰胺+0.4%(w/v)聚乙二醇+1×TBE缓冲液(pH8.3)。在9kV电压下12分钟内可分离DNA分子量梯度标准品(50bp至300bp)及PCR扩增产物,表观分子量与电泳迁移时间的曲线适合度大于0.9999。B型扩增产物表观分子量范围为282bp至285bp,非特异性扩增产物为276bp至280bp。C型为119bp至120bp,当前扩增条件下不产生非特异性扩增产物。结论非变性毛细管电泳能够方便和准确地判断非特异性的B型扩增产物

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