摘要：目的探讨流式细胞术检测T淋巴细胞亚群的理想温度,时间及抗凝剂。方法随机采集健康志愿者全血6份,分别用不同的抗凝剂抗凝,4℃及室温(18~25℃)保存,在不同时间点(0.5 h、2 h、5 h、24 h、36 h、48 h及72 h)分别使用荧光抗体标记,后上机检测;对同一份标本平行标记后,平分放于4℃及室温,在不同的时间节点(0.5 h、1 h、3 h、5 h、7 h、24 h)检测CD3^+T淋巴细胞、CD3^+CD4^+辅助性T细胞、CD3^+CD8^+杀伤性T细胞的阳性率及荧光强度。结果1 h内上机检测,枸橼酸钠、肝素、乙二胺四乙酸,三者抗凝剂,避光与否,孵育温度(室温&37℃)等因素对检测结果均没有明显影响;与EDTA抗凝,室温避光标记,40 min内上机检测结果比较,标本室温保存时,CD3^+T淋巴细胞和CD3^+CD4^+辅助性T细胞在48 h时检测结果出现变化,而CD3^+CD8^+杀伤性T细胞在72 h时出现变化;标本存放与4℃,CD3^+T淋巴细胞和CD3^+CD8^+辅助性T细胞在2 h时检测结果出现变化,而CD3^+CD4^+杀伤性T细胞在5小时时检测结果出现变化。标记后,无论标本存于室温还是4℃,CD3^+T淋巴细胞和CD3^+CD4^+辅助性T细胞在24小时时结果出现变化,而CD3^+CD8^+杀伤性T细胞在1小时时就发生了变化。结论1小时内上机检测,抗凝剂,避光与否,孵育温度对检测结果无明显影响;抗凝标本应在室温保存,48 h内完成检测;标记后标本应在1 h内上机检测。

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