摘要：抑制差减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),是抑制PCR与差减杂交技术相结合而产生的.其优点是在差减杂交过程中使不同丰度cDNA的拷贝数差异趋于均衡,因此不同丰度的差异表达基因都能得到有效克隆,能有效分离低丰度的差异表达基因,避免了表达序列标签分析中高丰度基因重复测序的缺点.因此SSH技术被应用于植物差异表达基因的分离.香蕉果实采后成熟过程中发生一系列复杂的生理变化,这些变化涉及到许多基因的表达.为了研究香蕉果实采后与采前在基因表达上的差异,我们首次采用抑制缩减文库的方法,以分离香蕉果实在采后表达的基因.以采后0h的香蕉果实cDNA为驱动子,对香蕉果实采后48h果实cDNA为待测子,进行抑制缩减杂交,抑制缩减杂交产物与pGEM-TEasy Vecter连接,转化E.coli DH5α,构建了抑制缩减文库.该文库共包含312个克隆,采用PCR方法对文库进行了重组子的鉴定,共有302个重组子.该文库的构建成功为深入研究香蕉果实采后基因的表达奠定了基础,为研究香蕉果实采后成熟的分子生物学机理提供了一个新的思路.

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社