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发卡样NF—κB特异性RNA干扰表达载体的构建及体外效应研究

作者：王明海; 王锋超; 陆建华; 麦跃; 刘晓宏; 程天民; 粟永萍 刊期：2004年第08期

目的采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,通过构建人NF-κB p65基因的特异性siRNA真核表达载体,体外观察对NF-κB基因的沉默作用,以及对内毒素(LPS)刺激后NF-κB活性的调控作用.方法采用基因克隆技术,将合成的发卡样特异性p65 RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体(pPUR/U6),构建p65 siRNA的表达载体,转染体外ECV-304细胞,48h后观测胞内NF-κB ...

人A20基因ORF的克隆

作者：吴丽娟; 蒋建新; 朱佩芳; 康格非; 王正国 刊期：2004年第08期

目的克隆人A20 ORF,为人A20的体外合成、抗体制备奠定基础.方法从LPS诱导的人外周血白细胞炎症模型中提取总RNA,用特异性引物介导的逆转录反应合成cDNA第一链,经巢式梯度RT-PCR的两次扩增,最终得到2 36l bp长的人A20 ORF并插入pCRR4-TOPOR载体测序验证.结果采用巢式梯度RT-PCR我们成功收获了人A20 ORF,测序结果与GenBank公布结果完全一致.结论采...

注射用内给氧对低氧血症患者行纤维支气管镜检的作用

作者：朱琳; 黄英; 徐绍萍 刊期：2004年第08期

我科室自2001年以来,对部分低氧血症患者行纤维支气管镜检时予鼻导管给氧联合注射碳酸酰胺过氧化氢内给氧,能快速提高动脉血氧分压,使检查治疗能顺利进行,现报告如下.1对象与方法对象:病人76例,经胸部x光检查及血气分析检测,均为肺疾病低氧血症患者,需行纤维支气管镜检查,按随机分段分组:对照组38例,实验组38例.

三羟异黄酮对脐静脉内皮细胞ECV304增殖影响与VEGFR的关系

作者：余小平; 糜漫天; 朱俊东 刊期：2004年第08期

目的探讨三羟异黄酮(genistein)抗肿瘤血管生成的机制.方法通过绘制生长曲线和流式细胞仪检测三羟异黄酮和血管内皮生长因子(vaScular endothelial growth factor,VEGF)对脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响,应用免疫沉淀和激酶活性分析方法检测ECV304细胞血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growthfactor receptor,VEGFR)磷酸化水平和蛋白...

人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达

作者：姜曼; 黄钢; 黎万玲; 白云 刊期：2004年第08期

目的克隆人LIGHT分子的全长cDNA,构建重组真核表达质粒pCI-neo-LIGHT并在293T细胞上获得稳定表达.方法从人T细胞cDNA文库中用PCR技术克隆人LIGHT全长cDNA,装入T-Easy载体,测序证实后,将LIGHT cDNA装入质粒pCl-neo中构建真核表达载体.用电穿孔法转染293T细胞,经G418筛选后,用流式细胞仪检测LIGHT分子的表达.结果测序证实克隆的LIGHT全长cDNA阅读...

去甲二氢愈创木酸对人恶性胶质瘤细胞系CHG-5生长的影响

作者：徐承平; 卞修武; 章容; 殷育松 刊期：2004年第08期

目的观察去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)对人恶性胶质瘤细胞系CHG-5体内外生长的影响.方法采用MTT法、流式细胞仪、光镜等技术观察CHG-5细胞体外增殖、细胞周期、凋亡和裸鼠移植瘤生长情况.结果NDGA可显著抑制CHG-5细胞体外增殖,G0/G1期细胞明显增多,S、G2/M期细胞减少,凋亡细胞增加.采用接种后第5天按50 mg/kg腹腔内注射给...

纳升电喷雾质谱鉴定维甲酸诱导HL60细胞分化相关蛋白质

作者：牟芝蓉; 吴玉章; 李晋涛; 周伟; 魏斌 刊期：2004年第08期

目的鉴定维甲酸诱导肿瘤细胞分化有关蛋白质.方法双向电泳分离维甲酸诱导分化前后HL660细胞蛋白,PDQuest软件分析筛选分化肿瘤细胞特异表达的蛋白点,用纳升电喷雾质谱对酶解消化样品进行部分氨基酸的序列测定,数据库比较即可得知是已知或未知蛋白.结果PDQuest分析全反式维甲酸(atRA)诱导分化前后HL60细胞蛋白双向电泳图谱,有许多蛋白表达水平有...

90Sr-90Y敷贴治疗皮肤血管瘤的疗效分析

作者：史文杰; 王新冕; 陈向志 刊期：2004年第08期

我院自1997年9月至2003年9月用放射性同位素90Sr-90Y敷贴治疗皮肤血管瘤76例,获得较好疗效,现报告如下.1资料与方法1.1临床资料76例患者均来源于本院皮肤科门诊,男29例,女47例,年龄0.2～69岁;其中面颈部41例,四肢24例,躯干7例,其它4例;病灶范围最小0.2 cm×0.3 cm,最大5.7 cm×7 om;血管瘤病理分类及年龄分组见表1.

血管内皮生长因子及其Flt-1受体在白血病细胞中的表达

作者：张伶; 陈辉; 李维; 涂植光; 冯文莉; 黄宗干 刊期：2004年第08期

目的探讨人白血病细胞系血管内皮生长因子(VEGF)及其Fh-1受体的表达,进一步阐明VEGF在白血病细胞异常增殖中的作用机制.方法以人脐静脉血管内皮细胞系ECV304作为对照,采用RT-PCR半定量技术和免疫组化检测体外培养的人白血病细胞系K562和HL-60中VEGF及Flt-1的表达.采用MTT试验观察VEGF反义寡核苷酸(VEGF-AS)对白血病细胞体外增殖的影响.结果K562...

塞来昔布对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用

作者：李军尧; 欧武陵 刊期：2004年第08期

目的研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用.方法用MTr比色法观察其对肝癌细胞生长的影响;荧光显微镜和透射电子显微镜检测细胞凋亡,TUNEL染色法记数细胞凋亡指数,流式细胞仪定量分析.结果塞来昔布以剂量依赖的方式抑制SMMC-7721细胞的生长,2、10、20及40mmol/L塞来昔布对肝癌细胞的生长抑...

第六届全国微生态调节剂学术研讨会会讯及征文通知

刊期：2004年第08期

LIGHT-Fc基因转染对食管癌细胞株Eca109抑制作用的初步研究

作者：熊刚; 杨康; 白云 刊期：2004年第08期

目的探讨LIGHT对人食管癌细胞的体外抑制效应.方法以DOTAP脂质体介导LIGHT-Fc基因转染人食管癌细胞株Eca109,通过绘制细胞生长曲线及MTF比色法观察LIGHT-Fc转染对Eca109细胞生长的影响,用RT-PCR法检测LIGHT受体在Eca109细胞上的表达.结果LIGHT-Fc基因的表达可以抑制Eca109细胞的生长.在低血清培养时,Eca109/LIGHT细胞的生长曲线较对照组明显降低...

上颌hé殆垫式矫治器中hé堤的制作体会

作者：李雨轩; 周继祥; 冉光亮; 汪欣 刊期：2004年第08期

乳牙列期和混合才列早期的前牙反hé对青少年正常的颅颌面部生长发育危害较大。因而需要尽早矫治。上颌hé垫式活动矫治器是临床上最为常用的治疗手段。适合多数前牙反hé病例的矫治。其基本的工作原理为：矫治器以同位体的作用而相对固定在上颌牙弓；hé堤的作用是使反hé的前牙脱离咬合锁结；然后逐步调节加力弹簧缓慢地推上前牙向唇侧移动，最终解...

新型重组毒素hIL15M/TNFαM的构建、表达与活性测定

作者：刘芳; 丁蕾; 毛晓华 刊期：2004年第08期

目的 构建、表达hIL15M／TNFαM融合毒素，为研制可消除hIL15受体高表达细胞的特异性导向药物奠定基础。方法 人白介素15突变体(hILJ15M)对靶细胞不具有激动作用，将该突变体与INFα突变体(TNαM)编码基因直接融合克隆至pET表达载体，并纯化出融合蛋白hIL15M／INFαM，MTT法测定该蛋白的细胞毒活性。结果 SDS-PAGE分析表明，重组菌株诱导后可以表达...

苦黄注射液致药物热2例

作者：李志勇; 曹利峰 刊期：2004年第08期

苦黄注射液系中药制剂,由苦参、大黄、大青叶、茵陈等中药组成,具有清热利湿,疏肝退黄作用,临床上用于治疗有湿热内蕴、胆汁外溢、黄疸胁痛、乏力、纳差等症的黄疸型病毒性肝炎患者,有较好的退黄作用.我院在应用苦黄静脉滴注治疗黄疸型肝炎时发生2例药物热,报告如下.例1:女41岁,因乏力1月,纳差、尿黄3 d于2002年4月17日入院.查体:体温37℃,皮肤...