重庆医科大学学报杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

靶向呼吸道合胞病毒M2基因pshRNA载体质粒的构建及意义

作者：崔玉霞; 王萍玲; 周娟; 杨锡强 刊期：2006年第01期

目的：构建针对呼吸道合胞病毒（RSV）M2基因mRNA的短发卡结构状RNA（shRNA）重组载体质粒，为利用RNA干扰技术抗RSV感染的深入研究奠定基础；方法：按shRNA设计原则，选择RSV—M2基因作为靶基因，设计19bp长的能产生短发卡结构的两段DNA反向重复序列，中间以9bp序列间隔，经退火形成互补双链，克隆至转录载体pgenesil-1上，重组质粒经酶切和测...

呼吸道合胞病毒单克隆抗体抵抗株的体内筛选

作者：赵晓东; W．Sullender; 杨锡强 刊期：2006年第01期

目的：Palivizumab（PZ）是目前唯一用于防治感染性疾病的单克隆抗体药物，主要用于预防高危患儿RSV感染。体外筛选获得的PZ逃逸株F基因发生众多突变，且在棉鼠体内完全抵抗大剂量PZ预防效应。本研究评估RSVPZ逃逸株在动物体内是否出现。方法：用环磷酰胺（CY）腹腔注射法制备免疫抑制棉鼠模型，鼻腔接种病毒前24h或后6周肌注15mg／kgPZ。感染后...

重组抗原CP4-EPSPS的表达及免疫学活性研究

作者：唐霓; Yu; Xiang; Helen; Ke; Zhihui; Yao; 敬凌霞; 黄爱龙; 郑建 刊期：2006年第01期

目的：表达并纯化重组CP4-EPSP合成酶（CP4-EPSPS），研究重组CP4-EPSPS的免疫学活性；为进一步制备单克隆抗体和开发检测CP4-EPSPS的快速诊断试剂奠定基础。方法：诱导表达含转基因大豆CP4-EPSPS的重组载体pET-EPSPS。经Ni-NTA琼脂糖树脂亲和层析纯化，以ELISA、胶体金试条、Western杂交鉴定其免疫活性。结果：重组CP4-EPSPS以包涵体表达为主，...

空肠弯曲菌Pen：19 cadF基因真核表达重组质粒的构建与表达

作者：郑惠; 蔡方成; 邓兵; 钟敏 刊期：2006年第01期

目的：构建空肠弯曲菌Pen：19cadF基因真核表达重组质粒，并证实其能在COS-7细胞中表达。方法：以含有KpnI和EcoRI酶切位点的同一对引物行PCR反应，获得空肠弯曲菌Pen：2、Pen：8、Pen：19和Pen：21cadF基因DN段。并选择与格林-巴利综合征最为相关的空肠弯曲菌Pen：19PCR产物为目的基因片段，插入到真核表达载体pcDNA3．1（＋）中，以构建重组质...

c-raf-1反义寡核苷酸转染对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用

作者：吴永忠; 任庆兰; 李少林 刊期：2006年第01期

目的：探讨c-raf-1基因反义寡核苷酸转染对人卵巢癌SKOV，细胞增殖的抑制作用及其分子机制。方法：实验分3组：正常对照组、c-raf-1正义治疗组、c-raf-1反义治疗组。脂质体转染后不同时间分别进行MTT试验、集落形成试验、荧光显微镜检测、蛋白质荧光强度测定，以观察不同条件处理后各组细胞的增殖、凋亡、蛋白质表达有无差别。结果：反义治疗组...

四环素双表达调控表达载体的构建、鉴定

作者：周智; 倪艳; 雷宇; 王蜀强; 陈压西; 任红 刊期：2006年第01期

目的：构建在同一载体中可用四环素调控表达目的基因的载体。方法：以pcDNA4^TM/TO为模板，用PCR法扩增含四环素调控表达序列的片段TO（位于NdeⅠ和SacⅡ之间），插入pUC118载体中测序，选择测序正确的序列取代pVITRO3载体中相应的片段，构建成pVITRO3-TO。用相同的方法以pcDNA6/TR为模板扩增四环素阻遏蛋白基因（TR），经测序证实后插入pVITRO3...

TIMP-3对内皮细胞增殖抑制作用的研究

作者：李生伟; 甘霖; 王一如; 刘长安; 龚建平; 李钺; 李友伟 刊期：2006年第01期

目的：探讨TIMP-3对内皮细胞增殖的抑制作用及特点。方法：采用形态学观察、MTT法、[^3H]-TdR掺入法流式细胞仪分析等技术方法观测不同浓度TIMP-3作用下人脐静脉内皮细胞增殖活性的变化。结果：①不同浓度（10～100ng／ml）的TIMP-3处理HUVEC细胞不同时间（1～7天）后，生长均有显著抑制作用且呈现明显的剂量和时效依赖关系。②经TIMP-3处理后，...

PEDF抑制大鼠角膜移植术后新生血管作用的实验研究

作者：王巧玲; 周善璧; 陈曦; 张盟辉 刊期：2006年第01期

目的：探讨局部应用色素上皮细胞衍生因子（pigment epithelium derived factor，PEDF）滴眼液抑制角膜移植术后角膜新生血管（corneal neovascularization，CNV）的作用及其可能机制。方法：建立大鼠同种异体间穿透性角膜移植模型，术后把72只大鼠随机平均分为实验组（10nM的PEDF眼液）和对照组（赋形剂滴眼液）。对术眼角膜用裂隙灯显微镜观察...

生存素在膀胱癌中的表达与癌细胞增殖和肿瘤复发关系的研究

作者：何卫阳; 苟欣; 肖明朝; 李云祥 刊期：2006年第01期

目的：探讨新的凋亡抑制基因生存素（survivin）在膀胱移行细胞癌（bladder trantional cell cancer，BTCC）中的表达和ki67基因表达的相关性，及其与肿瘤复发的关系。方法：应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法（SP），检测survivin和ki67在58例BTCC中的表达，另取10例癌旁正常组织做对照，同时进行随访，随访时间为11～48月，...

CD34^＋细胞体外定向诱导分化的实验研究

作者：姜蓉; 王建伟; 王亚平; 王莎莉 刊期：2006年第01期

目的：探讨造血生长因子不同组合方式对CD34^＋细胞体外定向诱导分化作用。方法：应用阴性分选策略，以Stemsept^TM系统从正常人骨髓细胞中分离CD34^＋造血干／祖细胞（HSC／HPC），在液体培养体系加入不同组合细胞因子对CD34^＋细胞进行诱导，检测细胞总数、CD71^＋细胞和CD15^＋细胞比例及粒单系祖细胞和红系祖细胞扩增数量。结果：液体培养体...

细胞因子诱导离体胰岛β细胞凋亡及其机理研究

作者：余华荣; 张能; 方海立; 董毅龙 刊期：2006年第01期

目的：观察白细胞介素1-β（IL-1β）、肿瘤坏死因子（TNF）和γ-干扰素（IFN-γ）引起胰岛细胞凋亡、胰岛素分泌、bcl—xl和bax蛋白表达的变化。方法：应用体外单层培养的3-5天的Wistar大鼠胰岛细胞，分别检测IL—1β、TNF和IFN—γ对胰岛细胞凋亡细胞百分率、以及培养液中基础和高糖刺激下胰岛素分泌量、NO含量、NOS活性、bcl—xl和bax蛋白表达以及D...

更正说明

刊期：2006年第01期

结缔组织生长因子在大鼠心肌梗死后心肌间质重塑中表达的研究

作者：顾永林; 马康华; 罗素新 刊期：2006年第01期

目的：探讨心肌梗死后心肌间质重塑中结缔组织生长因子（CTGF）在心肌组织的表达，以进一步探讨心肌重塑的分子机制。方法：SD大鼠24只，随机分为假手术组和心肌梗死组，结扎左冠状动脉前降支建立大鼠心肌梗死后心肌间质重塑模型，假手术组不结扎左冠状动脉，均观察8w。用生物化学方法测定心肌组织胶原蛋白含量以了解心肌间质重塑。用免疫组织化...

Beta-Catenin，APC蛋白，C-myc及Cyclin D1在卵巢上皮肿瘤中的表达及意义

作者：林晓; 李昱; 张雄 刊期：2006年第01期

目的：探讨卵巢上皮性肿瘤的beta—catenin，APC蛋白及c—myc，cyclin D1的表达及意义。方法：采用ABC免疫组织化学染色方法检测48例卵巢上皮性肿瘤（其中包括18例良性肿瘤，13例交界性肿瘤及17例恶性肿瘤）的beta—catenin，APC蛋白，c-myc及cyclin D1的表达。结果：beta—catenin在卵巢恶性上皮肿瘤及交界性上皮肿瘤中异常表达率均明显高于其...

HSP90的抑制剂Geldanamycin对乳腺癌细胞侵袭、转移能力的影响

作者：罗红霞; 邓华瑜; 郑维萍 刊期：2006年第01期

目的：探讨HSP90抑制剂Geldanamycin（GA）对高转移性乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MDA-MB-435s侵袭、转移能力的影响。方法：噻唑兰比色（MTT）法检测两株细胞对人工基底膜（Matrigel）的粘附能力变化；Transwell Chamber体外侵袭运动实验研究GA处理前后MDA-MB-231、MDA-MB-435s细胞侵袭、运动能力的改变。结果：GA处理后的MDA-MB-231和MDA-MB-435s...