摘要：目的探讨羟基脲对不同p53状态肝癌细胞的GADD45β诱导差异及可能调控机制。方法转染p53全序列建立Hep3B＋p53；体外合成GADD4513近端启动子序列群（-618～-314），构建荧光素表达质粒，转染肝癌细胞株HepG2、Hep3B和Hep3B＋p53；以实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）比较羟基脲对GADD4513表达诱导及其近端启动子活性影响差异；比较对DNA合成和细胞克隆形成能力抑制差异；通过Caspase-3的表达变化测定凋亡的发生和发展。结果羟基脲对Hep3B中GADD45诱导并不明显，转染p53全基因序列后，Hep3B＋p53对羟基脲的敏感性明显增加，并呈现出剂量-效应的正相关。荧光素分析提示羟基脲作用Hep3B＋p53后的启动子核转录因子（NF）-κB（-618／＋6）和E2F-1（-470／＋6）活性较Hep3B明显增强约1．1倍和0．8倍。羟基脲能够更加明显地抑制Hep3B＋p53的DNA合成能力和细胞克隆形成能力，10mmol／L羟基脲对Hep3B＋p53DNA合成抑制率达到37．15％，对细胞克隆形成能力的抑制率达85．29％，与Hep3B比较差异有统计学意义（P〈0．05）。羟基脲作用后Hep3B＋p53的Caspase-3能够迅速地启动凋亡的发生和发展。结论p53对核糖核苷酸还原酶抑制性化疗药物对肝癌细胞的GADD45诱导起重要作用，增强转录调节因子的表达水平是其可能的作用机制。

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