摘要：目的构建分泌性表达肿瘤坏死因子(TNF)-α的重组卡介苗.方法分别以卡介苗(BCG)和TNF-α cDNA为模板,通过PCR扩增得到117bp的BCG-Ag85B信号肽序列和702 bp的TNF-α基因序列.将BCG-Ag85B信号肽序列插入大肠杆菌-卡介苗穿梭质粒pMV261,得到重组质粒pMS.再将TNF-α基因序列克隆至pMS中,得到重组质粒pMSTNF.结果质粒pMSTNF用双酶切和PCR扩增及测序鉴定证实,克隆基因BCG-Ag85B和TNF-α正确插入载体pMV261.结论重组质粒pMSTNF可望在BCG中分泌性表达细胞因子TNF-α,从而协同加强对肿瘤的杀伤作用,该质粒的成功构建为改造卡介苗、发展新型抗膀胱肿瘤疫苗提供了依据.

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