摘要：目的探讨单个shRNA质粒联合抑制LNCaP细胞人端粒酶催化亚单位（hTERT）和雄激素受体（AR）基因表达的可行性。方法使用RNAi—DNA载体技术，将hTERT和ARsiRNA的DNA模板同时插入到载体Pgenesil，构建成重组质粒Pgenesil—hTERT—AR—shRNA，转染至LNCaP细胞，与空白对照、Pgenesil—HK．shRNA（通用阴性质粒）、Pgenesil—hTERT—shRNA和Pgenesil-AR—shRNA比较，利用实时荧光定量PCR技术观察其对LNCaP细胞hTERT和AR基因mRNA表达的影响。采用AnnexinV方法检测细胞凋亡，MTT比色分析法测定细胞增殖活性。结果空白对照组、Pgenesil—HK—shRNA组、Pgenesil—hTERT—shRNA组、Pgenesil—AR—shRNA组和Pgenesil—hTERT—AR—shRNA组细胞的hTERT基因mRNA分别为（1．51±0．08）×10^8、（7．32±0．43）×10^7、（2．94±0．15）×10^6、（4．45±0．25）×10^7、（3．17±0．18）×10^6（copies／ml），各组AR基因mRNA分别为（1．92±0．11）×10^5、（6．47±0．32）×10^5、（3．70±0．24）×10^4、（1．22±0．06）×10^4、（7．21±0．41）×10^7（copies／ml），提示Pgenesil—hTERT—shRNA对hTERT基因mRNA有抑制作用，Pgenesil—AR—shRNA对AR基因mRNA有抑制作用，Pgenesil-hTERT—AR—shRNA对hTERT和AR基因mRNA都有抑制作用（P〈0．05）。Pgenesil—bTERT—AR—sbRNA与Pgenesil—hTERT—shRNA、Pgenesil—AR-shRNA比较，引起的细胞凋亡、细胞生长抑制更加明显（P〈0．05）。结论含有hTERT—shRNA和AR—shRNADNA模板的重组表达质粒Pgenesil—hTERT—AR—shRNA能够明显抑制hTERT和AR基因的表达和前列腺癌细胞的生长。

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