摘要:背景:如何减轻甚至消除脂多糖(LPS)引起的全身炎症反应是目前研究的热点;库普佛细胞(KC)的激活与LPS的这种作用密切相关,但关于其具体的机制尚有待于进一步研究.目的:探讨LPS对KC CD14表达的影响及CD14在LPS激活KC中的意义.设计:完全随机前后对照研究.地点和对象:在第三军医大学西南医院病理学研究所完成.大鼠KC来源于Wistar大鼠,购自第三军医大学实验动物中心.干预:在分离培养大鼠KC的基础上,作者应用LPS直接或LPS刺激KC后产生的介质刺激新培养的KC,或在血清存在的情况下加入抗CD14单抗或在无血清的情况下单独加入LPS等措施刺激KC细胞.主要观察指标:各种条件下CD14 mRNA的表达及其蛋白合成的变化、培养KC中上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和一氧化氮浓度.结果:①CD14mRNA表达及其蛋白合成在正常KC中极弱,分别为0.035和19.91±2.89,浓度为10 mg/L的LPS分别为0.73和676.79±24.95,其量与LPS浓度呈剂量依赖性相关.浓度为10μg/L的LPS刺激后KC中CD14 mRNA表达及其蛋白合成在30 min即明显增强,分别为0.56和548.86±40.43,至6 h达高峰(0.54和673.91±35.08).②在血清存在时加入抗CD14单抗或在无血清时单独加入LPS,可明显降低KC TNF-c,L-6和一氧化氮的释放.而后者如果同时加入LBP,则可明显上调培养KC中的TNF-α,L-6和一氧化氮浓度.结论:①LPS及其刺激KC后产生的活性介质与CD14 mRNA的表达及其蛋白合成密切相关,并推测在实验1~3 h的CD14表达的增强可能主要由LPS引起,而此后CD14表达的进一步增强可能与KC释放的细胞因子密切相关.②低浓度LPS对KC的激活是CD14依赖的.
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