摘要：该文研究益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用，并初步探讨其作用机制，为益气解毒方的临床应用提供新的理论依据。用不同质量浓度（0．125，0．25，0．5，1．0g·L^-1）的益气解毒方水提物、阳性对照药（顺铂，4．0mg·L^-1）、抑制剂PD98059（50vanol·L^-1）、激活剂isoproterenol hydrochloride（ISO，20μmol·L^-1）、激活剂ISO＋益气解毒方水提物0．5g·L^-1处理CNE2细胞，使用实时无标记细胞功能分析仪（RTCA）和CCK-8法检测细胞增殖活性，并计算出半数抑制浓度（IC50），用荧光双染流式细胞仪PI染色检测药物作用后细胞周期分布情况；Westernblot法检测周期相关蛋白和MAPK／ERK信号通路相关蛋白的表达水平。RTCA和CCK-8法检测结果显示，与正常培养组比较，益气解毒方水提物能够有效抑制CNE2细胞增殖（P〈0．01），呈剂量和时间依赖性，48hIC。为0．5g·L^-1；细胞周期结果显示，水提物处理48h后，G0／G1期比例降低，G2／M期比例增加，阻滞细胞周期于G2／M期（P〈0．01）；Westernblot实验结果显示，经过不同浓度水提物处理48h后，细胞周期相关蛋白cyclinDl，cyclinD3，CDK2表达下调，MAPK／ERK信号通路相关蛋白p-c-Raf，p-MEK，p-ERKI／2表达明显下调，与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0．05）；在此基础上，加人MAPK／ERK信号通路的激活剂和抑制剂，结果显示，加入激活剂ISO，细胞增殖明显高于正常培养组，周期相关蛋白cyclinD!，cyclinD3，CDK2表达量均提高，同时，该信号通路关键蛋白p-c-Raf，p-MEK，p-ERKl／2的表达量也相对上升；而加入抑制剂PD98059后，细胞增殖明显低于正常培养组，相应蛋白的表达量亦降低，与对照组相比差异明显（P〈0．05）。益气解毒方水提物主要通过下调MAPK／ERK信号通路关键蛋白p-c-Raf，p-MEK，p-ERKl／2的表达，阻滞细胞周期，抑制CN

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