首页 期刊 中国药理学通报 乳腺癌MCF-7细胞p21(WAF1/CIP1)启动子区HDAC1高功能结合位点的研究 【正文】

乳腺癌MCF-7细胞p21(WAF1/CIP1)启动子区HDAC1高功能结合位点的研究

作者:邹丹; 周伟强 沈阳医学院病理生理学教研室; 辽宁沈阳110034; 沈阳医学院辽宁省环境污染与微生态重点实验室; 辽宁沈阳110034
乳腺癌   组蛋白去乙酰化酶1   辛二酰苯胺异羟肟酸   瘦素  

摘要:目的研究乳腺癌MCF-7细胞中组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)募集于p21(WAF1/CIP1)启动子区调控其转录活性的特异性结合位点。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol·L(-1)0.88μL SAHA(S组)、0.625 nmol·L(-1)10μL Leptin(L组)处理24 h,对照组(B组)细胞培养在完全型RPMI 1640培养基中。各组细胞裂解液与HDAC1抗体孵育,收集纯化结合HDAC1抗体的DN段,应用Realtime PCR法检测p21(WAF1/CIP1)启动子区从TSS到其上游(+2~-4 000 bp)f1~f10片段的DNA相对表达量并用2-ΔΔCT法分析。结果 B组中,HDAC1抗体在p21(WAF1/CIP1)启动子区f1、f8片段有高亲和力,f8片段达最高。S组中,HDAC1抗体与p21(WAF1/CIP1)启动子区f1~f10片段结合量明显低于对照组,f8片段达最低,而在L组此片段与HDAC1抗体结合量达最大值。结论乳腺癌MCF-7细胞增殖过程中,HDAC1可被招募至p21(WAF1/CIP1)启动子区,该启动子区上游-2 800 bp至-3 200 bp DN段是与HDAC1高度结合的靶功能区。

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