首页 期刊 中国实验动物学报 东方田鼠胚胎成纤维细胞永生化细胞系的建立 【正文】

东方田鼠胚胎成纤维细胞永生化细胞系的建立

作者:成钢; 罗赛群; 盖楠; 熊德慧; 李荣; 胡维新 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心; 长沙410078
东方田鼠   胚胎成纤维细胞   永生化   sv40t抗原  

摘要:目的建立东方田鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为全面研究东方田鼠抗日本血吸虫机制以及开展不同动物成纤维细胞间比较研究奠定基础和提供细胞实验材料。方法运用脂质体介导的基因转染法将pSV3neo质粒导入第3代东方田鼠胚胎成纤维细胞,经G418筛选抗性克隆并扩大培养,建立永生化细胞系;用PCR检测细胞株中SV40T基因的整合,RT-PCR鉴定SV40T基因在转染细胞中的表达;绘制东方田鼠胚胎成纤维永生化细胞生长曲线。结果阳性细胞克隆已扩大培养并稳定传代50代,经鉴定SV40T抗原已整合到东方田鼠胚胎成纤维细胞中且稳定表达。结论成功建立东方田鼠胚胎成纤维永生化细胞系。

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