摘要:目的比较球磨法、低温超高压破碎法和YeastBuster酵母细胞裂解液法破碎表达乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的重组汉逊酵母(Hansenulapolymorpha,HP)细胞的效果。方法分别采用球磨法、低温超高压破碎法和细胞裂解液法破碎表达HBsAg的重组HP细胞和重组酿酒酵母(Saccharomycescerevisiea,SC)细胞,测定其细胞破碎率、细胞破碎后蛋白和HBsAg释出量,比较3种方法破碎细胞的效果。结果球磨法使球磨罐和磨球中少量杂质渗入样品,其中氧化锆罐.氧化锆珠组合破碎重组HP细胞形成的杂质较少,破碎率约为60%,氧化锆罐一玻璃珠组合破碎重组HP细胞后蛋白浓度最高达2.71mg/ml,HBsAg释出量最高为180.04ug/ml;低温超高压破碎法破碎重组HP细胞破碎率最高为71.18%,细胞破碎后蛋白浓度最高可达6.72mg/ml,HBsAg释出量最高为350.63ug/ml;细胞裂解液法破碎细胞平均破碎率为60.30%,破碎不同次数的蛋白浓度及HBsAg释出量差异较大。结论低温超高压破碎法更适合破碎表达HBsAg的重组HP细胞。
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