摘要：目的:构建tPA乳腺定位表达载体,使其在牛乳汁中高效表达,观察目的基因表达的规律及其影响因素,为建立新型牛乳腺生物反应器提供理论基础.方法:RT-PCR法克隆目的基因,通过酶切、连接、分离、纯化等方法构建含tPA-cDNA的乳腺定位表达载体;采用乳腺注射法将融合基因转入小鼠及牛的乳腺组织中.结果:乳腺注射外源基因后,tPA可在小鼠和牛的乳汁中表达.结论:乳腺注射法可使目的基因在乳腺组织中稳定地表达较长的时间,其表达量与显微注射法没有明显的差异,表明外源基因的表达不受转基因方法的影响.但tPA在牛乳汁中的表达量明显高于小鼠的表达量,提示不同动物的乳蛋白调控系统有一定的差异,可能受着不同的因素或调控系统的影响.

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