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使用cDNAPCR-文库技术扩增感兴趣样品的cDNA

作者:杨明亮; 侯力 大连铁路卫生学校; 辽宁大连116001; 大连医科大学; 辽宁大连116001
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摘要:在病理学研究中对病变组织和正常组织进行基因表达差异的分析。可能获得与疾病发生发展相关联的致病基因。目前有一大批基因表达差异的分析技术,如表达序列标签(EST)、基因表达系列分析(SACE)、差异展示(DD—RTPCR)、代表性差异分析(RDA)、抑制性消减杂交(suppressive subtractive hybridization,SSH)以及基因芯片基础上的技术(cHp—based approach)等,但这些技术需要2—20μg不等的mRNA起始材料。随着显微切割技术的应用,精确获得感兴趣组织或细胞已经成为可能。而对精确获得的少量细胞样本与正常细胞进行基因表达类型的分析,变为将显微切割技术与基因表达差异分析技术结合为一体的一个障碍。笔者使用TaKaRa公司的cDNAPCR-文库(cDNAPCR—Library)技术对获得的eDNA样本进行扩增,并对此技术的优缺点进行分析。

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