摘要：目的：构建靶向人ClC-2基因小分子干扰RNA（siRNA）真核细胞表达载体。方法：根据DEQOR提供的siRNA设计原则和程序，设计两个靶向ClC-2基因的发夹状siRNA；通过化学合成的方法合成两对分别互补的寡核苷酸链，退火后得到编码该siRNA的ClC-2基因片段。将该片段连接至经BglⅡ和HindⅢ双酶切的真核细胞表达载体pSUPER．puro的多克隆位点，转化扩增提取质粒；对重组质粒进行EcoRⅠ和HindⅢ双酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定。脂质体Lipofectamine^TM2000介导瞬时转染，通过RT-PCR检测人胶质瘤细胞系BT-325细胞中ClC-2mRNA表达。结果：经酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定，目的片段与真核细胞表达载体pSUPER．puro连接正确。转染两重组质粒细胞的ClC-2mRNA表达明显降低。结论：成功构建人ClC-2基因干扰真核表达载体2个。分别命名为pSUPER．puro-siClC-21和pSUPER．puro-siClC-22，可用于进一步研究ClC-2基因对人胶质瘤侵袭和迁移活动的影响。

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