首页 期刊 畜牧与兽医 鸡黑素皮质素受体-4多肽抗体的制备与鉴定 【正文】

鸡黑素皮质素受体-4多肽抗体的制备与鉴定

作者:郎斌; 朱弘焱; 王佳美; 苏玉虹; 田玉民 辽宁医学院畜牧兽医学院; 辽宁锦州121000
鸡   mc4r   多肽抗体   特异性  

摘要:根据GenBank中报道的鸡黑素皮质素受体-4(melanocortin-4 receptor,MCAR)一级结构信息,用TMHMM2.0和DNAstar软件分析MC4R蛋白的跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性以及抗原性等,综合考虑抗体设计的其他因素,设计出1段15个氨基酸的多肽。将合成后的多肽与牛血清白蛋白(BSA)偶联,用与BSA偶联的MC4R多肽免疫新西兰兔,3个月后获取血清,亲和纯化出抗MC4R多肽抗体。通过ELISA法检测效价,Western blot和免疫组化法检测抗体特异性。通过该方法得到了高效价与高特异性的鸡MCAR多肽抗体,ELISA法测定其效价可达到1:128000,而且该抗体可用于免疫组化,说明所制备的鸡MC4R抗体具有高特异、高效价等特点,将为鸡MC4R基因的功能研究提供物质基础。

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