首页 期刊 现代医药卫生 DLL4/Notch信号途径对A549细胞VEGF表达的影响 【正文】

DLL4/Notch信号途径对A549细胞VEGF表达的影响

作者:孙晓东 王珺 王燕 田宗文 武汉大学医学院人体解剖学与组织胚胎学系 湖北 武汉430071 湖北医药学院基础医学研究所 湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学研究所 湖北十堰442000 武汉大学医学院人体解剖学与组织胚胎学系 湖北 武汉430071
酶联免疫吸附测定   rna干扰   dll4   notch信号途径   a549细胞  

摘要:目的:研究Delta-like ligand 4(DLL4)与血管内皮生长因子(VEGF)在人肺腺癌A549细胞中的表达,以及DLL4对VEGF表达的影响。方法(1)用免疫组化检测DLL4与VEGF在A549细胞中的表达;(2)设计和化学合成靶向DLL4基因的小干扰RNA(siRNA)序列,用lipofectamineTM2000介导DLL4 siRNA转染人A549细胞;(3)提取细胞总RNA,进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增检测DLL4、VEGF mRNA;(4)用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测A549细胞培养上清液中VEGF质量浓度。结果(1)DLL4、VEGF表达于A549细胞的细胞质内;(2)DLL4 siRNA可使DLL4沉默,同时,明显上调VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C mRNA表达,差异有统计学意义(P<0.05);(3)DLL4转染后,细胞培养上清液中VEGF质量浓度明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论阻断A549细胞中Notch通路可刺激VEGF过表达。

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