杂志简介:《细胞与分子免疫学》杂志经新闻出版总署批准,自1985年创刊,国内刊号为61-1304/R,是一本综合性较强的医学期刊。该刊是一份月刊,致力于发表医学领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目:专家论坛、基础研究、临床研究、抗体工程、技术方法
作者:陈殿君 李晓松 赵晖 石秀丽 张欢欢 范忠义 眺咏明 杜楠 刊期:2012年第04期
目的:利用RNA干扰(RNAi)技术在体外干扰小鼠B16黑素瘤细胞Foxp3基因表达,探讨RNA干扰用于黑素瘤治疗的可行性。方法:针对Foxp3基因设计小干扰RNA(siRNA),构建起短发夹状RNA(shRNA)慢病毒表达载体,并转染小鼠B16细胞,在体外诱导RNA干扰。分别采用Western blot和RT-PCR检测Foxp3基因的表达情况;ELISA检测TGF-β1、TGF-β2和IL-10等细胞...
作者:胡海艳 陈全 陈炎 刘革力 张璐渝 刊期:2012年第04期
目的:建立稳定过表达整合素连接激酶(ILK)的肺癌A549细胞模型,探讨ILK过表达对肺癌A549细胞生物学活性的影响。方法:以RT-PCR法扩增人ILK基因,构建pEGFP-ILK重组质粒。经酶切及测序鉴定后,将pEGFP-ILK质粒用脂质体转染肺癌A549细胞,G418压力筛选出稳定转染细胞克隆并扩大培养(A549/pEGFP-ILK组),设pEGFP-C1空质粒转染A549细胞(A549...
作者:杜宁 杨斌 胡丽娟 赵阳 孙欣 郭志伟 任宏 刊期:2012年第04期
目的:探讨Smac基因过表达对食管癌细胞株Eca109顺铂化疗敏感性的影响。方法:脂质体介导将带有GFP的pcDNA3.1-Smac重组体及带有GFP的pcDNA3.1空白载体转染人食管癌细胞株Eca-109,G418筛选阳性克隆,荧光显微镜下观察转染效率,Westernblot检测转染前后细胞内Smac蛋白表达水平的变化。顺铂处理组(1、5、10mg/L)和顺铂未处理组分别处理转染...
作者:任丽芬 马越云 岳乔红 苏明权 郝晓柯 刊期:2012年第04期
目的:研究TFDP3对前列腺癌LNCaP细胞自噬及凋亡作用的影响,以及探讨TFDP3与E2F1相互作用后对前列腺癌LNCaP细胞自噬及凋亡的调控作用。方法:采用重组质粒pcDNA3.1-TFDP3,pCMV-E2F1-HA分别转染LNCaP细胞,并设空载体对照组。转染24h后提取细胞总RNA和蛋白,以实时定量RT-PCR检测TFDP3、E2F1、以及LC3B基因表达的变化,Westem blot方法检测自...
作者:陈劲松 莫群 谢永进 郭玉松 黄婷婷 任磊 王升启 伯晓晨 任艺虹 刊期:2012年第04期
目的:寻找醛固酮独立致心肌纤维化(MF)的分子。方法:利用差速贴壁法分离培养胎儿心肌成纤维细胞(FCFs);选择3-4代细胞给予醛固酮(ALD)处理8h、提取各组总RNA,用基因组芯片检测差异表达基因,利用Western blot和RT-PCR对部分基因表达产物进行验证。结果:ALD处理后表达水平改变的基因共1519个,其中上调的714个,下调的805个。选择与MF...
作者:魏玉平 吴金香 郭元芳 孙高英 张强 毕文祥 董亮 刊期:2012年第04期
目的:探讨MADD在肺正常组织及肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:收集肺临床病理组织标本,免疫组化法检测肺正常组织和肺癌组织MADD表达;培养人肺腺癌A549细胞,逆转录PCR检测其IG20基因表达;用携带MADD基因的质粒和能够沉默MADD表达的慢病毒载体分别转染A549细胞,Western blot、MTT分析和流式细胞术检测其MADD表...
作者:李玉英 贾海燕 郭慧 王转花 刊期:2012年第04期
目的:研究重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)对HepG2细胞增殖、凋亡、迁移及胞内活性氧(ROS)的影响。方法:以不同浓度的rBTI蛋白(1.25—10 μmol/L)作用肝癌HepG2细胞,通过MTT比色法检测rBTI蛋白对HepG2细胞增殖抑制作用;DAPI荧光染色法观察凋亡细胞的发生及形态学变化,流式细胞术(FCM)检测细胞内活性氧变化、划痕擦伤实验检测rBTl蛋...
作者:郝彦斐 罗泰来 王平 康健 柏银兰 王丽梅 徐志凯 刊期:2012年第04期
目的:探讨重组耻垢分枝杆菌Ag85B-ESAT6-rMs对小鼠巨噬细胞功能的影响。方法:将耻垢分枝杆菌(Ms)与重组耻垢分枝杆菌Ag85B-ESAT6-rMs分别感染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,通过抗酸染色和细胞内细菌菌落形成单位计数评价Ms和Ag85B-ESAT6-rMs被巨噬细胞吞噬和消化能力;采用流式细胞术检测巨噬细胞凋亡情况;分别采用实时定量PCR技术和ELISA检测...
作者:李宜川 叶文忠 刘国玲 张玉霞 沈永杰 常景芝 刊期:2012年第04期
目的:研究雷公藤内酯醇(TP)对大鼠胶原性关节炎(CIA)及足爪组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法:采用鸡Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型,观察药物对CIA大鼠体重及足肿胀度的影响,免疫组化法观察大鼠足爪组织中MMP-2蛋白的表达。结果:TP可有效缓解CIA大鼠体重减轻及明显抑制CIA大鼠足爪肿胀;治疗后TP组足爪组织MMP-2阳性表达比模型...
作者:刘军权 朱云 陈复兴 张南征 吕小婷 周忠海 张娟 张颂 陶征中 李昳 刊期:2012年第04期
目的:观察多种活化因子共刺激后对人外周血淋巴细胞增殖和表型的影响。方法:用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞(PBMC),根据加入刺激因子(CD3 mAb、CD28 mAb、IFN-γ、IL—1α、IL-2、IL-15和IL-21)种类和方法不同将实验分为7组。用全自动五分类血液分析仪计数不同细胞因子诱导培养的PBMC增殖力、流式细胞术测定诱导后共刺激细胞表面C...
作者:赵东利 党诚学 隋燕霞 刊期:2012年第04期
目的:观察C-erbB2基因shRNA表达质粒对结肠癌HT-29细胞生长抑制、细胞周期和凋亡的影响。方法:用MTT法及流式细胞仪分别检测pGenesil-erbB2实验组(PEG)、转染试剂对照组(TRCG)、阴性质粒对照组(NPCG)细胞对结肠癌细胞生长曲线、细胞周期及细胞凋亡率的影响。结果:pGenesil-erbB2实验组、转染试剂对照组、阴性质粒对照组的生长抑制率分...
作者:赖新强 黄秀艳 曾耀英 刊期:2012年第04期
目的:研究脱水淫羊藿素(AHI)在体外对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞免疫功能的影响。方法:分离制备小鼠骨髓来源巨噬细胞;CCK-8法检测不同终浓度的AHI对巨噬细胞的毒性;采用Griess试剂盒检测AHI对巨噬细胞产生NO的影响;流式细胞术(FCM)检测AHI对巨噬细胞吞噬E.coli颗粒的影响;利用FCM结合双色免疫荧光染色技术检测AHI对巨噬细胞早...
作者:杨慧 任英 朱平 陈丽娜 吕明华 樊春梅 王彦宏 刊期:2012年第04期
目的:拟建立体外人外周血CD4^+ T细胞与CD14^+单核细胞共培养体系,观察脂多糖(LPS)活化的单核细胞,在联合或不联合抗CD3 mAb、不同浓度和时间条件下对诱导Th17细胞分化的影响。方法:采用免疫磁珠法分离纯化健康志愿者外周血CD4^+ T细胞与CD14^+单核细胞,在两者共培养体系中分别单加LPS或抗CD3mAb、抗CD3mAb刺激下添加不同浓度LPS刺激...
作者:高燕 汪习 张巍 徐元基 于继云 郭炳冉 阎瑾琦 刊期:2012年第04期
目的:构建人干扰素仅的高效表达质粒pEE14.1-IFN-α,并在真核细胞中验证其表达。方法:通过PCR获得人IFN-α基因,连入过渡载体pCI-GPI,然后克隆入高效表达载体pEEl4.1中,构建重组表达质粒pEE14.1-IFN-α。瞬时转染293T细胞后48h收获上清,采用ELISA,Western blot分别验证目的基因表达。结果:pEE14.1-IFN-α经酶切和测序分析,与预期设计...
作者:李晨燕 孙青竹 杨旭东 钟波 韩燕 吕社民 刊期:2012年第04期
目的:构建人PRMT1基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法:采用RT-PCR技术扩增人PRMT1全长cDNA;经过双酶切、连接等反应,构建pcDNA3.1(+)-PRMT1真核表达载体,并转化DH5α感受态细胞;用含氨苄青霉素的LB培养基筛选阳性克隆;经菌液PCR及测序鉴定重组质粒;瞬时转染A559细胞,采用实时定量PCR检测重组质粒的表达水平及PRMT1对eota...