摘要：为了研究Dicer及其所产生的miRNAs在血管平滑肌细胞 （VSMC）中的作用，本研究采用条件性基因打靶法敲除了小鼠VSMC中的Dicer外显子23，通过采用连续性剖检妊娠小鼠法、病理组织学、免疫荧光、PCR、Western blot和实时PCR等技术对条件性敲除Dicer（Dicer cKO）胚胎的血管病变和VSMC中的Dicer、miRNAs和信号转导通路蛋白变化进行了详细研究．结果发现，在培育条件性敲除Dicer小鼠的过程可产生三种不同基因型小鼠，即野生型、杂合型和纯合型（Dicer cKO）小鼠．其中野生型和杂合型小鼠出生后无明显临床异常，而Dicer cKO小鼠却死于腹中而不能出生．Dicer cKO胚胎在胚胎发育的第12.5天（E12.5）就出现发育迟滞变化，在E14.5，皮肤、骨骼肌和肝脏的血管极度扩张、血液淤滞和广泛的弥漫性出血，在E15.5死亡．Dicer cKO胚胎血管壁的病变于E13.5即出现，主要表现为血管中膜的VSMC排列不整，增生减少；E14.5血管壁变薄、塌陷，管腔不规则，细胞增生明显减少；E15.5血管壁的结构完全破坏，细胞增生停止，血管壁的屏障作用破坏，通透性增强，向外渗血．在胚胎发育的E14.5，VSMC标志性基因的表达明显下调，VSMC中大部分受检miRNAs的表达也明显降低，磷酸化的信号转导通路蛋白，即细胞外信号调节激酶和蛋白激酶明显衰减．研究证明，Dicer是血管发育所必需的基因，它可通过控制miRNA产生和成熟来调节VSMC标志性基因的表达，借以促进VSMC的增殖与分化，保障血管壁结构的完整．

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