首页 期刊 食品与生物技术学报 酿酒酵母中PiggyBac转座子筛选系统的构建 【正文】

酿酒酵母中PiggyBac转座子筛选系统的构建

作者:周林希; 柳艺石; 赵神保; 张慧杰; 高晓冬; 藤田盛久 江南大学生物工程学院; 江苏无锡214122
酿酒酵母   piggybac转座子   基因筛选  

摘要:PiggyBac(PB)是来源于粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)的TTAA型转座子。PB转座子系统可作为一种插入型突变工具,应用于多种真核细胞中。本研究在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中构建了一个基于PB转座子的筛选系统。系统由插入ADE2基因编码框的PB转座子及由半乳糖启动子调控表达的PB转座酶(PBase)两部分组成。在PBase诱导下,PB转座子可以从原始位点无痕移除并随机插入新的基因位点。PB转座子在转座过程中保持单一拷贝数,在每个突变细胞中只有一个插入位点,并可快速检测突变基因。实验结果表明:所构建的PB转座子筛选系统可应用于酿酒酵母中的基因筛选。

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