摘要：用蛋白酶k酚氯抽提法从圆斑星鲽、高眼鲽、大菱鲆和真鲷4种海水鱼的肌肉组织中提取基因组DNA，根据金枪鱼、牙鲆及相关鱼类的线粒体DNA（mtDNA）序列保守片断设计出扩增引物，扩增从16SrRNA到NIM之间约9400bp的mtDNA长片段。用10种限制性内切酶（Hinf Ⅰ, Hind Ⅲ, EcoR Ⅴ, EcoT22 Ⅰ, Mun Ⅰ, EcoT14 Ⅰ, Apa Ⅰ, Bin Ⅰ, Ava Ⅱ, Dra Ⅰ）对扩增得到的mtDNA长片段进行限制性酶切和分析，其中8种酶有酶切位点。利用Nei—Li的片断法计算出单倍型的片断共享度，根据片断共享度计算出4种鱼之间的遗传距离，用Mega3．1软件构建NJ系统关系树，同时探讨利用线粒体大片断PCR—RFLP方法进行鱼类系统发生研究的特点。

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