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沉默组织因子重组腺病毒的构建和胰岛中沉默效果检测

作者：李钊伦; 薛武军; 田普训; 丁小明; 田晓辉; 冯新顺; 侯军 刊期：2007年第09期

目的构建复制缺陷型重组腺病毒介导短发夹RNA（shRNA）干扰组织因子（TF）在胰岛表达。方法设计并合成四对单链寡核苷酸（ss oligo）,经变性退火为双链寡核苷酸（ds oligo）插入穿梭质粒pENTR/U6载体,测序正确后经脂质体介导入成人胰岛,通过实时定量RT-PCR方法筛选对TF沉默效果最佳穿梭质粒pENTR/U6-shRNA,然后与腺病毒骨架质粒行同源重组,筛选...

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1基因沉默对肺癌细胞生物学行为的影响

作者：梁璇; 南克俊; 徐勤枝 刊期：2007年第09期

目的研究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（LKB1）基因表达沉默对肺癌细胞生物学行为的影响。方法以RNA干扰技术建立LKB1表达抑制的细胞模型,Western blotting方法检测干扰LKB1蛋白表达的效果;通过绘制生长曲线和克隆形成试验检测LKB1基因沉默肺癌细胞的增殖变化;应用Annexin V/PI双染法和流式细胞技术分析LKB1基因沉默后肺癌细胞周期的变化及其凋亡和坏...

血管紧张素Ⅱ2型受体对AngⅡ诱导成年大鼠心肌成纤维细胞分泌α-TNF和IL-1β的作用

作者：蒋小英; 高广道; 周娟; 国荣; 林元喜 刊期：2007年第09期

目的探讨血管紧张素Ⅱ2型受体（angiotensinⅡtype2 receptors,AT2）在成年心肌成纤维细胞分泌肿瘤坏死因子α（α-TNF）和白介素1β（IL-1β）中的作用,明确AT2受体和AT1受体作用的差异。方法差速贴壁分离及培养成年SD大鼠心肌成纤维细胞,将细胞分为4组进行药物干预：对照组、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）组、AngⅡ＋氯沙坦（losartan）组、AngⅡ＋PD1233...

肝移植术后主要神经系统并发症的发生和治疗

作者：易述红; 李华; 杨扬; 陆敏强; 蔡常洁; 许赤; 易慧敏; 汪根树; 陈规划 刊期：2007年第09期

目的观察肝移植术后主要神经系统并发症的类型及临床表现,并探讨其病因、易发因素及防治策略。方法回顾性分析2003年10月至2005年9月完成的467例肝移植患者的临床资料,对肝移植术后出现神经系统并发症的病例进行统计分析并结合文献进行讨论。结果共有91例（19.49%）患者发生神经系统并发症,其中弥漫性脑病72例,脑血管意外12例,癫痫发作4例,脑桥...

DNA损伤检测点介质1和p53结合蛋白1在人食管癌细胞系TE-1.TE-13.Eca109中的表达及意义

作者：刘志坤; 祝淑钗; 王玉祥 刊期：2007年第09期

目的研究DNA损伤检测点介质1（MDC1）和p53结合蛋白1（53BP1）在人食管癌细胞系中的表达及意义。方法采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学法、间接免疫荧光法和Western blotting检测MDC1、53BP1mRNA和蛋白在人食管癌细胞系TE-1.TE-13.Eca109的表达水平。结果RT-PCR结果显示MDC1、53BP1mRNA在所检测的人食管癌细胞系中均有表达;免疫细胞化学法、间接...

脊髓内移植间充质干细胞的转铁蛋白受体显像

作者：丁为民; 田嘉禾; 白金柱; 沈丽 刊期：2007年第09期

目的探索放射性核素显像活体追踪移植干细胞的可能性。方法用放射性受体分析定量测定体外培养人间充质干细胞（hMSCs）的转铁蛋白受体表达。兔脊髓内移植人间充质干细胞,蛛网膜下腔注入^131I标记铁胞和转铁蛋白后不同时间,用伽玛相机采集图像。感兴趣区（ROI）技术对图像进行半定量分析。磷屏放射自显影验证活体显像。结果hMSCs高表达转铁蛋白受...

化学发光法中和抗体检测技术对广州地区人5型腺病毒的流行病学研究

作者：苏晓波; 马鑫; 洪喆瑜; 吴后波; 王友绍; 陈凌 刊期：2007年第09期

目的建立高通量、可定量中和抗体检测方法,并且调查广州健康成人及儿童人群中人5型腺病毒中和抗体存在情况。方法采用以带有分泌型碱性磷酸酶报告基因的5型重组腺病毒使用化学发光法,调查116份成人血清和94份儿童血清中5型腺病毒中和抗体情况。结果该方法是一种适合高通量调查的血清学调查方法,广州地区成人中人5型腺病毒中和抗体阳性比例占26.7...

正常幼龄豚鼠巩膜组织毒蕈碱受体五种亚型的表达

作者：刘琼; 吴捷; 王新梅; 曾骏文 刊期：2007年第09期

目的探讨正常幼龄豚鼠眼巩膜组织毒蕈碱受体（M受体）五种亚型的表达。方法2周龄三色豚鼠6只,RT-PCR检测巩膜组织M受体亚型的mRNA的表达,免疫荧光法染色检测M受体的蛋白水平的表达。结果豚鼠巩膜组织中有M受体五种亚型mRNA的表达,其中以M1亚型的表达最高。激光共聚焦显微镜观察发现,在巩膜基质中可见到M受体五种亚型的表达绿色荧光,围绕在成纤维...

Galectin-1在大肠癌组织中的表达及其临床意义

作者：朱曦龄; 梁莉; 丁彦青 刊期：2007年第09期

目的检测Galectin-1在大肠癌组织、癌旁正常组织及淋巴结转移癌中的表达情况,初步探讨其与大肠癌发生发展,侵袭转移的关系。方法（1）用SP免疫组化法检测158例临床石蜡组织标本（癌旁正常组织30例,腺瘤组织25例,大肠癌组织65例,淋巴结转移癌38例）中的Galectin-1蛋白的表达。（2）用实时RTPCR法分析Galectin-1mRNA在32对新鲜大肠癌组织及相应癌...

肝细胞生长因子对c-kit^＋Lin^-细胞的增殖作用

作者：张守华; 廖彩仙; 张春兴; 苏俊; 赖勇强; 周杰 刊期：2007年第09期

目的探讨在无血清无基质的条件下,肝细胞生长因子（HGF）和因子组合对扩增c-kit^＋Lin^-细胞的影响。方法采用免疫磁珠法分离小鼠骨髓c-kit^＋Lin^-细胞,研究在干细胞因子（SCF）,FLt-3配基（FL）,促血小板生成素（TPO）和白血病抑制因子（LIF）组合中添加不同浓度的HGF培养7d,检测细胞总数,c-kit^＋Lin^-细胞扩增倍数及细胞凋亡率。结果各因子...

黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤MMP9表达及其与EBV感染的关系

作者：冯智英; 莫祥兰; 邵春奎; 苏组兰 刊期：2007年第09期

目的探讨MMP9在黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤的表达及其与EBV感染的关系。方法用免疫组化SP法和原位杂交法检测59例黏膜NK/T以及成熟T细胞淋巴瘤MMP9和EBER表达情况,统计MMP9表达与EBV感染的关系。结果黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤MMP9和EBER阳性率分别为83.05%和72.88%,EBER阳性率与组织学类型有关（P〈0.01）;MMP9和EBER表达与临床分期和生存期均...

一种方便酶切鉴定的shRNA表达载体改建方法

作者：单志新; 林秋雄; 符永恒; 邓春玉; 余细勇 刊期：2007年第09期

目的建立一种用单限制性内切酶酶切来快速筛选重组小发夹RNA（shRNA）表达载体的方法。方法制备包含单一限制性内切酶ClaⅠ识别序列的双链DNA插入片段（ClaⅠ位点两侧碱基序列不互补）,与BamHⅠ和HindⅢ线性化的shRNA表达载体pSilencer-4.1（不含ClaⅠ识别序列）构建载体pSilencer-4.1-ClaⅠ。用BamHⅠ和HindⅢ酶切pSilencer-4.1-ClaⅠ,将酶切产...

口服葡萄糖耐量试验诱发急性左心衰1例报告

作者：高锦雄; 张彬; 查道刚; 许顶立 刊期：2007年第09期

据统计约有80％～90％急性左心衰的发生是有诱因的，凡能加重心脏负荷，增加心肌耗氧．妨碍心室充盈和心肌的供血供氧、能量代谢及离子转运的各种因素等都可诱发和加重心衰。常见的有感染、心律失常、妊娠和分娩、体力活动和情绪激动、输血输液过多过快、出血与贫血、电解质、酸碱平衡紊乱及药物使用不当等．但由口服葡萄糖耐量试验（OGTT）诱发...

肠易激综合征患者肠粘膜紧密连接蛋白claudin-1,-3,-4表达改变的意义

作者：孔武明; 龚均; 董蕾; 徐俊荣 刊期：2007年第09期

目的探讨claudin-1,-3,-4蛋白的改变在不同类型肠易激综合征患者发病中的作用。方法随机选择肠易激综合征患者43例分为腹泻型组23例、便秘型组20例,对照组20例,用Western blotting方法分别检测各组肠粘膜claudin-1,-3,-4蛋白含量。结果与对照组相比,小肠和结肠粘膜claudin-1蛋白含量在便秘型组均明显上升（P〈0.05）,在腹泻型组均明显下降（P〈0...

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刊期：2007年第09期