农杆菌介导法列表

棉花转基因技术和转基因棉花

概述了棉花转基因育种技术和转基因抗虫棉、转抗除草剂基因棉花、转抗病基因棉花、转品质改良基因棉花及天然彩色棉花等的研究概况。

千里光组织培养体系的构建与遗传转化

传统药材千里光化学成分复杂,富含生物碱、黄酮和萜类等化合物,极具药用价值。为了提高千里光次生代谢产物的含量,增加千里光药用价值,实现千里光资源的科学利用,本研究进行了千里光组织培养体系的构建和遗传转化初探。本实验以千里光幼嫩茎叶为外植体,通过不同浓度6-BA和NAA的组合,得到最佳愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6.0 g/L琼脂粉,出愈率达92%;得到最佳分化培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg...

紫花苜蓿基因转化的影响因素分析

通过农杆菌介导法对紫花苜蓿不同品种植株进行了抗旱基因转化的研究．得到了一套紫花苜蓿基因转化的优化体系。研究表明．100mg／L的卡那霉素对苜蓿愈伤组织的生长有着显著的抑制效应。250mg／L头孢霉素能够有效地抑制农杆菌菌株LBA4404的生长。紫花苜蓿供试材料被切后直接用OD600值为0．3～0．5的农杆菌LBA4404菌液侵染10～15min；培养材料共培养3d后在愈伤组织诱导培养基MS＋2mg／L2．4-D＋0．5mg／LKT＋30g／L蔗糖＋9g／L琼脂＋...

CCoAOMT基因反义表达载体的构建及转化苎麻的研究

采用RT-PCR的方法,克隆烟草木质素合成关键酶咖啡酰甲基转移酶(CCoAOMT)基因并测序.构建CCoAOMT基因反义表达载体,通过农杆菌介导法对苎麻进行遗传转化,得到转基因植株.采用PCR方法对其进行分子检测.为利用基因工程技术,创造适合我国国情的环保型低木质素苎麻转基因新品种奠定了基础.

转透明颤菌血红蛋白基因杨树的再生及其生长量初步测定

采用农杆菌介导法,将透明颤菌血红蛋白Vitreoscilla hemoglobin(VHb)基因vgb导入银腺杨(Populus alba ×P.glandulosa).以经无菌培养的叶片为外植体,通过450个叶盘与根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404共培养,将植物双元表达载体pPZV中vgb基因导入银腺杨基因组,经卡那霉素筛选后,共获得60株卡那霉素抗性植株.经PCR特异性扩增和Southern点杂交分析,证明其中52株再生植株基因组DNA中整合了vgb基因.RT-PCR分析结果表明,vgb...

农杆菌介导获得转基因抗虫匍匐翦股颖植株

利用转基因技术,将目的基因导入愈伤组织或原生质体,获得转基因植株提高抗逆性,已成为匍匐翦股颖遗传改良的重要手段(郭振飞和卢少云,2002).本实验利用农杆菌介导法,将经过改良的抗虫Bt基因cry1Ab导入匍匐翦股颖,初步建立了匍匐翦股颖遗传转化体系.

农杆菌介导的sbe2a基因RNAi载体对玉米遗传转化的研究

将淀粉分支酶基因sbe2a的RNAi表达载体转入玉米自交系H99和丹598胚性愈伤组织。探讨了不同菌浓度、不同侵染时间和不同的共培养时间对玉米转化率的影响,确定了最佳转化条件：菌液浓度OD600值为0.5～0.7,侵染时间为25min,共体培养时间为3d。对转化的愈伤组织分化诱导出苗后进行PCR检测,获得了2株阳性植株,初步证明外源基因已经整合到玉米的基因组中。

农杆菌介导WRKY Ⅱ基因转化马铃薯抗旱性研究

以马铃薯品种东农308和费乌瑞它微型薯为外植体,利用农杆菌介导法,将抗逆基因p3300-Ubi-WRKY Ⅱ导入马铃薯,经PCR和Southern-blot杂交检测,东农308和费乌瑞它分别有7株和5株呈阳性,证明p3300-Ubi-WRKY Ⅱ基因已整合到马铃薯基因组中。将转基因植株进行抗旱性试验,结果表明,转基因植株对水分胁迫的抗性比对照有显著提高。

小麦遗传转化技术研究进展（综述）

综述了基因枪法、花粉管通道法、离子束介导法、农杆菌介导法在小麦遗传转化上的应用及发展，展望各种转化技术的应用前景。

应用转基因技术培育花卉新品种

查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS)是花色素合成途径中的一个关键酶,它在植物中表达的量可能影响花的颜色。本项目从矮牵牛(Petunia hybrida)特定发育阶段花瓣的cDNA中,克隆到查尔酮合酶基因,进行质粒的重组,插入到含有花椰菜花叶病毒CaMV 35S启动子的植物转化载体中,首次通过原位生殖系统导入法(具体采用花粉管导入法)和农杆菌介导法分别转化仙客来和大岩桐。成功地得到4400余粒仙客来转化种子,8株白花植株的个别花瓣出现了黄斑...

转基因技术在兰花上的应用（综述）

本文综述兰花转基因技术的应用、转入的目的基因和转基因组织筛选与检测的研究进展.

水稻遗传转化方法研究与应用进展

转基因技术已成为植物分子生物学研究的有效手段。文章综述了6种水稻遗传转化方法的优缺点，其中，农杆菌介导法具有费用低、拷贝数低、重复性好、基因沉默现象少、转育周期短，且在理论上和技术上操作都比较成熟等优点，应用广泛。

农杆菌介导的玉米幼胚遗传转化体系的建立

采用玉米幼胚为受体材料,利用农杆菌介导植物表达载体p CAMBIA1300-35S-GUS-Nos侵染玉米幼胚,以GUS基因瞬时表达率为指标,通过单因素试验及四因素三水平正交试验研究了基因型、幼胚大小、侵染菌液浓度及侵染时间对幼胚遗传转化率的影响。结果表明：各因素对幼胚遗传转化率影响的大小依次为基因型〉幼胚大小〉侵染菌液浓度〉侵染时间;最佳侵染组合基因型为H99、幼胚为1.1~2.0 mm、侵染菌液OD600=0.6、侵染时间为30 min,GUS基因对幼...

沿海甜菜的遗传转化和转基因耐盐植株的获得

以沿海甜菜丛生芽芽尖为转化受体,采用农杆菌介导法将来自大肠杆菌的编码胆碱脱氢酶的betA基因和来自拟南芥的突变的als基因转入受体细胞,通过除草剂抗性筛选、耐盐性测定和外源基因的分子检测,获得了转基因耐盐植株.PCR阳性的抗除草剂的转化小芽在分别含有1.5%、2.0%、2.5%和3.0%NaCl的培养基上进行耐盐性检测,其存活率和生物量大幅度高于未转基因的对照小芽.将移栽成活的转基因植株用盐水浇灌,转基因植株表现出比对照明显提高的...

天山雪莲sikP基因提高番茄类黄酮含量的研究

【目的】将克隆得到的天山雪莲sikP基因转入番茄中，以提高番茄点黄酮的含量。【方法】利用农杆菌个导的叶盘法，把天山雪莲MYB转录因子sikP基因的植物过丧达载津pBl121-35S-sikP转入番茄，利用PCR和RT-PCR技术检测目的基因是否整合到番茄中斗丧达，将获得的转基因番茄和对照番茄生根后移栽至花盆中，分别对其点黄酮含量进行检测。【结果】在获得5株转基因番茄中，测得转基因番茄总黄酮质量分数明显提高，是对照组番茄总黄酮质量分...

农杆菌介导获得转淀粉分枝酶基因rbe1籼稻

用农杆菌介导法获得转淀粉分枝酶基因(rbe1)水稻珍汕97B、Ⅱ-32B,恢复系明恢86、明恢81和航1号.分子检测表明,rbe1已经整合到籼稻的染色体中;对转基因水稻后代遗传分离进行分析,获得初步结果.

农杆菌介导法获得草地早熟禾抗病虫转基因植株

"农杆菌介导法培育抗病抗虫草坪禾草新品种"是浙江省科技厅农业科研项目和江苏省农业科学院重点学科(研究领域)建设课题,2004年10月通过由浙江省科技厅组织的课题验收.

运用农杆菌介导法将PTA和反义Wx双基因导入水稻的研究

利用根癌农杆菌将含多基因(hyg选择标记基因、反义Wx基因、PTA基因、GFP和GUS报告基因)的pCAMBIA1304载体导入水稻品种(501R、中花9号和日本晴)的幼胚愈伤组织,分别在含35mg/L、45mg/L和65mg/L潮霉素浓度的筛选培养基上筛选获得抗性愈伤.后经PCR检测,从415株T0代再生植株中选出92株(其中501R、中花9号和日本晴分别为4株、43株和45株).对这些转基因后代植株进行Southern blotting分析表明:hpt、反义Wx和PTA基因已经整合进植物基因组...

提高作物转基因效率方法研究进展

近年来,随着植物基因工程的快速发展,利用转基因技术进行育种和基因功能研究成为了一种重要研究手段。作物转基因方法经过三十年的不断发展,不管在方法上还是体系方面都取得了显著的进展。本综述主要对目前在作物上应用最广泛的农杆菌介导法和基因枪法分别从化学因素(氨基酸,乙酰丁香酮,共培养pH)和物理因素(预培养天数,菌株类型,热激和干燥,髙渗负压处理等)在提高作物转基因效率方法上进行了梳理,以及两种转基因方法都适用的外植...

转双抗虫基因741杨

转双抗虫基因741杨是河北农业大学与中国科学院微生物所合作，经过近10年的研究，获得的高新技术树木新品种。该成果将部分改造的Bt CrylAc基因与慈菇蛋白酶抑制剂基因构建的双抗虫基因表达载体，通过农杆菌介导法转化了优良杂种741杨，并获得了一批对鳞翅目害虫具有不同抗虫性的株系。经过国家农业基因工程安全委员会安全评价，确定其安全等级为一级，并批准进行中间试验。在经过严格的中间试验和大田环境释放试验之后，获国家林...