首页 期刊 江苏农业科学 龙爪槐SRAP-PCR反应体系的建立与优化 【正文】

龙爪槐SRAP-PCR反应体系的建立与优化

作者:倪雅楠; 刘博 中央民族大学生命与环境科学学院; 北京100081
龙爪槐   正交试验   反应体系优化  

摘要:以龙爪槐(Sophora japonica f.pendula Hort.)叶片为材料,采用L(16)(4-5)正交设计试验,对SRAP-PCR反应体系中的Mg^2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物和模板DNA用量5个因素进行优化,并确立适用于龙爪槐SRAP-PCR反应的最佳体系。结果表明,龙爪槐SRAP-PCR反应的最佳体系为反应总体积12.5μL,Taq酶0.10 U、Mg^2+3.0 nmol/L、dNTPs 2.5 nmol/L、正反向引物均为1.2 nmol/L、DNA 100ng,其余体积用ddH2O补足。各因素水平变化对反应体系的影响影响大小依次为引物、模板DNA、Mg^2+、dNTPs、Taq酶。用35个龙爪槐样品对优化体系进行验证,均得到条带清晰、多态性丰富的图谱,证实了该体系的稳定性。

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