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太平洋真宽水蚤(Eurytemora pacifica)Cu/ZnSOD基因克隆及在重金属胁迫下的表达分析

作者:胡利腾; 夏立萍; 武敏敏; 陈晋; 张建设 浙江海洋大学海洋科学与技术学院国家海洋设施养殖工程技术研究中心; 舟山316022
铜锌超氧化物歧化酶   太平洋真宽水蚤   基因克隆   金属胁迫   实时荧光定量  

摘要:铜锌超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是一种广泛存在于生物体中最主要的抗氧化酶之一,在抵御过多活性氧簇对机体毒害的过程中起重要作用。本研究以太洋真宽水蚤为研究对象,采用RT-PCR与RACE方法克隆得到太平洋真宽水蚤Cu/ZnSOD基因全长cDNA序列。Cu/ZnSOD(GenBank登录号:MF289343)基因序列全长837bp,其中完全开放阅读框为456bp编码152个氨基酸,5’非编码区长297bp,3’非编码区长84bp,分子量约为15.050kDa,理论等电点为5.73。序列比较表明,太平洋真宽水蚤Cu/ZnSODcDNA的氨基酸序列与其他甲壳动物的一致性较高;存在8个蛋白翻译后修饰位点及蛋白家族标签序列,无跨膜结构域与信号肽。在重金属铬与镍胁迫下,通过实时荧光定量PCR对太平洋真宽水蚤Cu/ZnSODmRNA体内表达特点分析显示,其表达量均呈现先升后降趋势,在暴露12小时后表达量达到峰值;铬胁迫下的表达量略高于镍;联合胁迫下呈现出拮抗作用。本研究结果将有利于深入探讨桡足类Cu/ZnSOD基因的结构与功能,为进一步研究抗氧化分子机理奠定基础。

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