贵州医科大学学报杂志 统计源期刊

大肠杆菌Targetron基因打靶载体构建及应用

作者：黄瑾; 陈相好; 吴晓娟; 张峥嵘; 谷俊莹; 陈峥宏; 崔古贞 刊期：2019年第07期

目的:构建基于细菌Ⅱ型内含子的Targetron基因打靶载体,并在大肠杆菌中验证其功能。方法:以构建的pSY7载体为基础、以大肠杆菌lacZ基因为例,选择lacZ-1683a和lacZ-1874s位点为靶位点,利用在线设计软件设计打靶引物,通过重叠延伸PCR方法获得特异性打靶序列,并将其克隆到pSY7载体,获得pSY7-lacZ-1683a和pSY7-lacZ-1874s打靶载体,转化大肠杆菌后利...

艰难梭菌sigB基因簇CRISPR-Cas9敲除载体的构建及验证

作者：陈相好; 蔡梦迪; 陈峥宏; 谷俊莹; 文学琴; 洪伟; 崔古贞 刊期：2019年第07期

目的:构建艰难梭菌rsbV(编码anti-anti-sigma因子)、rsbW(编码anti-sigma因子)及sigB基因(编码sigma-B因子)的CRISPR-Cas9敲除载体。方法:利用重叠延伸PCR技术分别扩增针对艰难梭菌rsbV、rsbW及sigB基因的gRNA序列及同源臂序列,并分别将其克隆到pJZ23载体上,采用菌落PCR结合DNA测序验证所构建的基因敲除载体。结果:扩增获得艰难梭菌rsbV、rsbW、...

Cas9蛋白的克隆表达、分离纯化及多克隆抗体制备

作者：刘芳; 卢婷; 蔡梦迪; 吴芳草; 陈相好; 王彩霞; 崔古贞; 陈峥宏 刊期：2019年第07期

目的:获得高纯度Cas9蛋白,制备Cas9蛋白特异性抗体。方法:以Cas9基因序列为模板,设计特异性引物,PCR扩增获得Cas9基因全长序列,利用无缝拼接技术构建pET28a-Cas9重组表达载体;转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达Cas9蛋白,并利用His-Tag技术分离纯化Cas9蛋白;将纯化获得的Cas9蛋白免疫新西兰大白兔,制备Cas9蛋白多克隆抗体。结果:pET28a-Cas9重...

幽门螺杆菌菌落PCR的优化

作者：刘芳; 王彩霞; 綦廷娜; 吴芳草; 文学琴; 陈峥宏; 崔古贞 刊期：2019年第07期

目的:通过对常规菌落PCR方法进行优化,探索提高幽门螺杆菌(H.pylori)菌落PCR扩增效率的方法。方法:提取H.pylori 26695基因组DNA作为阳性对照组,以未经任何处理的H.pylori 26695菌落作为阴性对照组,经煮沸裂解速冻法获得的H.pylori 26695菌落作为试验组,随机选择8个不同的基因(16S rDNA、cagA-U、cagA-D、iceA、ureA、hetA、ropN、Hp0792)作为菌...

衰老小鼠肝脏、脾脏和骨髓中Blm解旋酶表达水平

作者：郑艺; 杨爽; 黄晏军; 汤长宁; 刘杰麟 刊期：2019年第07期

载脂蛋白E基因多态性与主观认知减退的相关性

作者：胡勇; 刘芳 刊期：2019年第07期

贵阳地区5 486例孕妇G6PD缺乏症基因突变筛查

作者：李頔; 卓召振; 王怡萌; 熊永红; 胡莉; 杨国珍; 黄盛文 刊期：2019年第07期

目的:了解贵阳地区孕妇人群葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的携带率及基因突变情况。方法:采集5486例孕妇外周静脉血并提取基因组DNA,采用多色探针荧光PCR熔解曲线法检测G6PD基因突变,分析基因突变情况。结果:5486例孕妇人群中筛出G6PD基因携带者184例,携带率为3.35%;共检出15种基因型和11种突变类型,其中最常见的5种突变类型是c.1388G>A、c.5...

三聚氰胺对雄性小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

作者：夏凤琼; 杨国珍; 黄健; 林明春; 肖礼红 刊期：2019年第07期

阿司匹林磷脂复合物脂微球的制备及评价

作者：贺智勇; 姜丰; 李婉蓉; 杨佳佳; 周雪; 吴林菁; 肖婷; 沈祥春; 陶玲 刊期：2019年第07期

目的:制备阿司匹林磷脂复合物脂微球(ASP-PC-LM),并评价其性质。方法:采用高速剪切法制备初乳,高压均质法对初乳进行二次乳化,以离心稳定常数(Ke)及平均粒径为考察指标,单因素试验考察处方和制备工艺,并对其外观、粒径、Zeta电位及包封率进行考察。结果:ASP-PC-LM最佳处方和工艺是橄榄油与辛癸酸甘油酯(MCT)以1∶1配比(15%),油酸(0.3%)、大豆磷...

PKA抑制剂在雌激素调控乳腺癌细胞纤连蛋白表达中的作用及机制

作者：王宏健; 刘晓红; 董宇华; 郭阳; 王旭东 刊期：2019年第07期

丹黄散对糖尿病大鼠溃疡创面愈合的影响机制

作者：邸铁涛; 张春玲; 陈露; 侯丹; 刘洹颖; 龙丽; 黄蔷 刊期：2019年第07期

促红细胞生成素通过AMPK-KLF2信号通路调节脑缺血后血管新生的分子机制

作者：刘敏; 王英; 王敬东; 张凤香; 李红燕 刊期：2019年第07期

蔬菜中五氯硝基苯和百菌清残留测定的QuEChERS应用与优化

作者：徐纬; 刘天洁; 黄琴 刊期：2019年第07期

目的:建立气相色谱-质谱法(GC-MS)同时测定蔬菜中五氯硝基苯和百菌清残留的QuEChERS前处理新方法。方法:蔬菜样品匀浆后精密称取15g,加入正己烷20mL超声提取、取上清液10mL经QuEChERS柱净化、氮吹至近干,用正己烷定容至1mL,采用GC-MS测定;蔬菜样品匀浆后同时采用现行农业行业标准NY/T761-2008《蔬菜水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸...

miR-181d-5p对人结肠癌细胞凋亡的影响及机制

作者：柯东平; 朱金祥; 毛俊倩; 马佳; 李建辉; 马龙安 刊期：2019年第07期

miR-808通过调控TGF-β1改善心肌梗死后心肌纤维化的机制

作者：史晓婧; 王延稳; 曹慧 刊期：2019年第07期