首页 期刊 广东医科大学学报 GPC3过表达载体的构建和表达检测 【正文】

GPC3过表达载体的构建和表达检测

作者:邱志东; 雷长江; 刘忠考; 黎然; 缪辉来 广东医学院附属医院肝胆外科; 广东湛江524001
质粒   肝细胞癌  

摘要:目的构建并检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)真核表达重组质粒。方法提取肾组织RNA进行逆转录,扩增GPC3基因的编码区,将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,酶切鉴定并测序;将克隆成功的质粒转染至Huh7细胞,用荧光定量PCR和Western blot检测GPC3的表达水平。结果成功扩增GPC3编码区,并克隆至载体pcDNA3.1中;GPC3过表达载体转染至Huh7细胞后,荧光定量PCR和Western Blotting检测结果显示GPC3mRNA和蛋白表达水平均明显增加。结论成功构建GPC3过表达载体可用于后续研究。

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