安徽医科大学学报杂志 北大期刊 统计源期刊

新型噬菌体展示载体pCANTAB5S的构建

作者：徐容; 潘卫; 沈毅珺; 陈秋莉; 潘欣; 冯春芝; 戚中田; 刘彦君; 邓松华 刊期：2004年第02期

目的进一步改造噬菌体展示载体,使之能更有效地展示各种外源随机多肽文库.方法以pCANTAB5X-IFN-α2b重组质粒为模板,在上游引物中引入Xba Ⅰ、Sac Ⅰ酶切位点,在下游引物中引入Sac Ⅰ、Stu Ⅰ、Sal Ⅰ酶切位点,将用该引物扩增的IFN-α2b衔接片段PCR产物克隆到pMD18-T中,再将该片段用Xba Ⅰ和Sal Ⅰ酶切并将之插入pCANTAB5L的Xba Ⅰ和Sal Ⅰ位点中,...

消息

刊期：2004年第02期

人CEA信号肽-EK位点-HBD2融合基因的构建

作者：杜剑平; 张青; 陈正堂 刊期：2004年第02期

目的构建人CEA信号肽-EK激酶-HBD2抗菌肽融合基因.方法 PCR方法将CEA信号肽、EK激酶识别位点序列、上下游酶切位点及保护性碱基克隆在一个片段上,酶切后,T4 DNA连接酶将此片段定向连接在含HBD2基因片段的pBluescript SK质粒上,构建成人CEA信号肽-EK激酶-HBD2抗菌肽融合基因pBluescript SK载体.结果融合基因经琼脂糖电泳、测序正确.结论成功构建...

NK-92细胞对人卵巢癌细胞体外杀伤活性

作者：陈纲; 凌斌; 祝怀平; 赵卫东; 张红雁; 吴爱东; 魏海明; 田志刚 刊期：2004年第02期

目的研究NK-92细胞对人卵巢癌细胞的体外杀伤活性以及放射线照射后对其杀伤活性的影响. 方法以体外培养人卵巢癌细胞系HO-8910为靶细胞,以NK-92的敏感细胞株K562作为对照,应用4 h 51Cr释放法检测不同效靶比情况下体外培养NK-92细胞的杀伤活性,并应用医用电子直线加速器对NK-92细胞进行照射处理(0、400 cGy)后再检测其杀伤活性变化. 结果 NK-92细...

人内皮细胞特异性分子-1的转染及其在ECV304中的表达

作者：陈厚早; 卜丽佳; 张素梅; 吴强; 周青; 桂淑玉; 汪渊 刊期：2004年第02期

目的构建人内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)真核表达载体,转染人脐静脉内皮细胞系ECV304,并在ECV 304中获得表达. 方法将ESM-1 cDNA插入真核载体pIRES的多克隆位点中,转染人脐静脉内皮细胞.原位杂交,免疫组化检测ESM-1基因的表达.结果构建的表达载体经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列分析证实,转染后发现ESM-1的表达在转录和蛋白水平都明显的增...

腺病毒介导mIFN-β基因转染的小鼠黑色素瘤细胞的体外生物学特性

作者：吴云; 徐容; 曹广文; 潘卫; 陈秋莉; 沈毅珺; 蔡春晓; 邓松华 刊期：2004年第02期

目的研究腺病毒(Ad)介导mIFN-β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体外生物学特性.方法用Ad为载体将mIFN-β基因导入B16细胞,观察mIFN-β基因转染的B16细胞的体外增殖能力及免疫原性的改变.结果当MOI为50～100,即可获得较高的转染效率,达90%±1%,转染细胞能表达分泌mIFN-β并具有生物学活性;AdmIFN-β感染对B16细胞的增殖能力无影响,但能显著提高细胞表...

大鼠下颌下腺内ncNOS及NT-3的表达

作者：彭彦霄; 柯红林; 伍雪芳; 王惠珠; 贾雪梅 刊期：2004年第02期

目的对大鼠下颌下腺内神经型一氧化氮合酶(ncNOS)及神经营养因子(NT-3)进行定性和定位研究.方法取10只SD大鼠下颌下腺,进行HE染色和免疫组织化学染色.结果大鼠下颌下腺颗粒曲管、纹状管及小叶间导管上皮细胞呈ncNOS及NT-3免疫反应阳性,而腺泡细胞则为阴性.结论大鼠下颌下腺导管上皮中有ncNOS及NT-3的表达,提示下颌下腺具有复杂的分泌功能.

奥曲肽抑制人肝癌细胞血管内皮生长因子的表达与合成

作者：傅斌生; 许戈良; 余继海; 任学雷 刊期：2004年第02期

目的探讨生长抑素类似物奥曲肽对人肝癌细胞株MHCC97-L中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达及VEGF合成与分泌的影响.方法利用酶联免疫吸附法、流式细胞仪、逆转录-聚合酶链反应检测不同剂量的奥曲肽对人肝癌细胞株MHCC97-L的VEGF合成与分泌及VEGF mRNA表达的影响.结果奥曲肽(10-5～10-10 mol/L)可以抑制人肝癌细胞株 MHCC97-L中VEGF mRNA表达及VEG...

乳腺癌中抑癌基因PTEN与cyclinD1的表达及意义

作者：周隽; 吴强; 吴正升; 杨枫 刊期：2004年第02期

重组胸腺素α1的克隆、表达与纯化

作者：宫照龙; 蒋作君; 徐义辉; 沈继龙; 董炜; 段招军 刊期：2004年第02期

目的利用基因工程方法表达重组胸腺素α1 (Tα1),并进行纯化、鉴定. 方法使用大肠杆菌偏爱密码子,人工合成Ref蛋白(T7噬菌体蛋白)和Tα1的融合基因,并克隆在表达载体pBV220中,转化E.coliDH5α,温度诱导表达,表达的重组蛋白Ref- Tα1经CM-Sepharose FF阳离子柱进行纯化,Western-blot进行鉴定. 结果获得了纯化的重组蛋白Ref-Tα1,相对分子质量约为15 000...

胎儿腮腺内瘦素和瘦素受体免疫组织化学观察

作者：伍雪芳; 彭彦霄; 柯红林; 王惠珠; 贾雪梅 刊期：2004年第02期

目的观察胎儿腮腺内瘦素和瘦素受体的表达、分布及发育规律.方法 HE染色法和免疫组化SABC法.结果胎儿腮腺纹状管、小叶间导管上皮细胞呈瘦素及瘦素受体免疫反应阳性,免疫反应产物分布于导管上皮细胞胞质内,细胞核呈阴性反应.在胚胎发育的不同阶段,免疫反应强度亦不等.结论胎儿腮腺内有瘦素和瘦素受体表达,可能参与调节胎儿腮腺和胃肠的发育及功...

人脂联素基因全长cDNA克隆

作者：时照明; 王长江; 王佑民; 章秋; 周剑; 胡红琳 刊期：2004年第02期

目的克隆人脂联素(ADPN)基因cDNA,为进一步研究ADPN的功能提供实验基础.方法应用RT-PCR方法从中国人大网膜脂肪垫总RNA中扩增出ADPN cDNA全长基因,克隆入载体pMD18-T中,形成重组载体pMD18-T/人 ADPN.筛选出阳性克隆,通过限制性内切酶酶切鉴定后对其进行测序.结果从脂肪组织总RNA中扩增得到745bp片段ADPN基因,其cDNA序列与GenBank人ADPN基因序列...

人抵抗素基因cDNA的克隆

作者：周剑; 王佑民; 王长江; 章秋; 胡红琳; 时照明 刊期：2004年第02期

目的克隆人抵抗素基因(hRETN)cDNA,为进一步研究RETN的结构和功能提供实验基础.方法应用RT-PCR方法从中国人网膜脂肪垫总RNA中扩增出RETN 基因cDNA,克隆入载体pMD18-T中,形成重组载体pMD18-T/hRETN.通过蓝白斑筛选出阳性克隆,限制性内切酶酶切鉴定后对其进行测序.结果从脂肪组织总RNA中扩增得到363 bp片段hRETN基因,其cDNA序列与Genbank hRETN基...

大鼠神经生长因子腺病毒表达载体的构建及其在星形胶质细胞中的表达

作者：刘宁; 朱风仪; 戴如飞; 王东; 赵春生; 周明卫 刊期：2004年第02期

目的构建含有大鼠β-NGF基因的重组腺病毒载体并观察其在星形胶质细胞的表达,为下一步在动物体内进行中枢损伤的基因治疗提供基础.方法设计一对含有HindⅢ及Sal Ⅰ酶切位点的β-NGF基因上下游引物,PCR法扩增含有大鼠β-NGF cDNA的质粒pUC19-β-NGF,产物经HindⅢ及Sal Ⅰ双酶切,插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,获得重组质粒pAdTrack-β-NGF,经Pme Ⅰ...

脊椎骨骨骺蛋白的细胞转染定位

作者：范礼斌 刊期：2004年第02期

目的利用重组的脊椎骨骨骺蛋白(Sedlin)的过表达来了解该蛋白质在细胞中的定位.方法用间接免疫荧光的方法观察Sedlin在细胞中的定位. 结果荧光显微镜观察表明Sedlin分布于细胞核和细胞质中,极可能是以膜泡的形式存在.-结论实验结果为进一步了解Sedlin的功能提供了细胞学基础.