摘要:目的对含小鼠过氧化物酶体增殖物反应元件(PPRE)报告质粒p4×PPRE-luc进行体外转化和扩增,为基于PPAR为靶标的药物筛选分子平台的建立提供高纯度、高丰度的报告载体。方法取p4×PPRE-luc质粒转化DH5α感受态菌,再接种到含氨苄青霉素的LB琼脂培养板进行抗性筛选培养,挑取阳性克隆菌落进行培养后抽提质粒,紫外分光光度计测定提取质粒的纯度和浓度,并取样进行琼脂糖凝胶电泳验证。结果经转化后获得了抗氨苄青霉素的阳性克隆菌落,挑取阳性克隆并经培养后提取的p4×PPRE—luc质粒其A260/A280=1.84,浓度为750ng/μl。结论成功转化并扩增了p4×PPRE—luc质粒,为基于PPAR为靶标的药物筛选分子平台的建立提供了高纯度、高浓度的报告质粒。
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