首页 期刊 作物学报 棉花半乳糖基转移酶基因GhGalT1启动子的克隆及表达分析 【正文】

棉花半乳糖基转移酶基因GhGalT1启动子的克隆及表达分析

作者:秦丽霞; 李静; 张换样; 李盛; 竹梦婕; 焦改丽; 吴慎杰 山西省农业科学院棉花研究所; 山西运城044000
棉花   糖基转移酶   启动子   顺式作用元件   gus组织化学染色  

摘要:糖基转移酶(glycosytransferase,GT)是催化活化的供体糖基转移到特异受体生成糖苷键的酶类,在应答多种生物和非生物胁迫中起重要作用。本研究利用PCR技术从陆地棉品种Coker 312基因组中分离克隆了GhGalT1基因的启动子,序列长度为539 bp,命名为pGhGalT1。启动子分析软件PlantCARE分析表明pGhGalT1含有CAAT-box、TATA-box核心元件,以及响应干旱、热、脱水、防御与胁迫应答的顺式作用元件MBS、HSE、MYCCONSE、TC-rich repeats和CGTCA-motif等。因此将pGhGalT1构建到启动子检测载体pBI101-GUS上,形成pBI101-pGhGalT1-GUS融合表达载体,以检测其启动子活性。通过农杆菌介导的浸花法转化拟南芥,经卡那霉素抗性筛选及PCR检测成功获得阳性转基因植株。对T3代转基因拟南芥进行组织化学染色分析显示该启动子主要在生长5~15 d的幼苗主根及侧根根尖表达,在子叶及莲座叶边缘也有微弱表达。非生物胁迫和激素处理后的组织化学染色、GUS酶活性及GUS基因定量分析结果显示GhGalT1基因的启动子受盐、渗透胁迫和激素(6-BA、MeJA、BL)的诱导,该结果为合理选用启动子改良作物提供理论依据。

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