首页 期刊 中华肿瘤防治 siRNA沉默Twist基因对结直肠癌细胞顺铂化疗敏感性的影响 【正文】

siRNA沉默Twist基因对结直肠癌细胞顺铂化疗敏感性的影响

作者:沈徐宁; 彭玉平; 李海强; 周元; 李进; 朱奕 嘉兴市第一医院肿瘤外科; 浙江嘉兴314000
结直肠癌   twist   sirna   上皮间质化   顺铂  

摘要:目的结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,本研究探讨应用小分子干扰RNA(siRNA)沉默Twist信号通路对结直肠癌顺铂化疗敏感性的影响及其可能机制。方法 0、0.0625、0.125、0.25、0.5和1μg/mL的顺铂作用于SW480和LoVo这种结直肠癌细胞株48h。Twist-siRNA转染这2种结直肠癌细胞株。CCK-8法计算转染前后顺铂对于两者的抑制率。EdU法检测癌细胞增殖能力。Hoechest 3344荧光染色检测细胞形态。蛋白印迹法检测不同药物作用下的Twist及上皮间质化相关标志物的表达变化。结果 LoVo和SW480细胞组中Twist表达量分别为0.824±0.124和0.191±0.039 9;Twist在LoVo中高表达,在SW480中低表达,差异有统计学意义,P〈0.05。SW480和LoVo对于顺铂的IC50值分别为(3.394±0.083)和(6.737±0.796)μg/mL,P〈0.05。wist siRNA干扰后SW480和LoVo对于顺铂的IC50值分别为(0.113 7±0.008 8)和(0.459 7±0.025 0)μg/mL,与单用顺铂组相比,差异均有统计学意义,均P〈0.05。Hoechest3344荧光染色结果表明,Twist转染组比未转染组出现了更加明显的细胞凋亡形态变化。CCK-8检测结果显示,采用Twist siRNA干扰后SW480和LoVo对于顺铂的IC50值分别为(0.113 7±0.008 8)和(0.459 7±0.025 0)μg/mL,与单用顺铂组相比,差异有统计学意义,P〈0.05。EdU法检测结果显示,Twist siRNA+顺铂组、顺铂组和正常组SW480细胞增殖率分别为(14.63±1.33)%、(25.55±1.73)%和(51.23±3.31)%;LoVo细胞增殖率分别为(22.35±2.39)%、(29.27±1.85)%和(64.62±3.61)%;与正常组和单用顺铂组相比,Twist siRNA+顺铂组的细胞增殖率明显降低,差异均有统计学意义,均P〈0.05。蛋白印迹法结果表明,Twist siRNA作用的同时伴随E-cadherin表达升高,而Vimentin表达降低,差异有统计学意义,P〈0.05。结论应用siRNA降低Twist信号通路活性可通过抑制上皮间质化过程而增加结直肠癌对于顺�

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