摘要:目的:探讨microRNA-218抑制胶质瘤侵袭、迁移、增殖和抑制肿瘤干细胞样细胞自我更新的分子机制.方法:在胶质瘤细胞中过表达miR-218,利用定量逆转录PCR(qRT-PCR)和免疫印迹法(Westernblotting)检测Bmil的表达水平,并利用创伤修复和体外迁移实验检测胶质瘤细胞的迁移和增殖能力;通过裸鼠移植瘤实验,检测体内过表达miR-218对胶质瘤生长的影响;利用生物信息学手段预测miR-218的直接靶标,并通过qRT—PCR、蛋白质印记技术、荧光素酶报告系统和免疫荧光实验对预测的靶标基因进行验证;以胶质瘤细胞球形成实验和极限稀释法验证miR-218对胶质瘤干细胞样细胞自我更新能力的影响;构建Broil干扰载体下调胶质瘤细胞中Bmil的表达,检测对胶质瘤迁移和增殖的影响;利用基因表达芯片分析胶质瘤细胞中miR-218对基因表达的影响.结果:Bmil是miR-218的一个直接靶标,miR-218通过下调Broil的表达来削弱胶质瘤细胞的迁移和增殖能力,并抑制胶质瘤干细胞样细胞的自我更新.另外,miR-218还参与调控一系列与胶质瘤细胞发育相关的基因.结论:作为一种肿瘤抑制因子,miR-218能阻止胶质瘤细胞的迁移、侵袭、增殖,并削弱其干细胞样特征.
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