首页 期刊 中华眼底病 视网膜色素上皮细胞中诱导型一氧氮合酶、精氨酸代谢相关酶的表达及一氧化氮对细胞紧密连接的影响 【正文】

视网膜色素上皮细胞中诱导型一氧氮合酶、精氨酸代谢相关酶的表达及一氧化氮对细胞紧密连接的影响

作者:张文一; 白海青; 王竫华 青岛大学医学院附属医院眼科,266003
rpe   紧密连接   精氨酸   视网膜色素上皮细胞   瓜氨酸  

摘要:目的 研究在免疫活化的视网膜色素上皮(RPE)细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)被诱导、产生NO时,其底物精氨酸的来源;产生的NO对RPE细胞紧密连接的影响。方法 用干扰素γ(IFNγ)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)刺激大鼠视网膜色素上皮细胞系(RPE-J)细胞,Northernblotting、Western blotting方法研究RPE-J细胞内精氨酸再生系瓜氨酸NO循环的相关酶的表达及地塞米松和环磷酸腺苷(cAMP)对iNOS表达的影响。并通过免疫细胞化学和Western blotting方法,研究产生的NO对RPE-J细胞紧密连接功能的影响。结果 活化的RPE-J细胞中,iNOS和精氨酸的再生系瓜氨酸-NO循环相关酶精氨酸琥珀酸合成酶(AS)在mRNA和蛋白质水平同时被诱导,精氨酸琥珀酸裂解酶(AL)没有被诱导,同时产生NO,cAMP可以增加NO的产量。NO不仅以精氨酸为底物产生,而且也可由瓜氨酸产生。产生的NO破坏RPE-J细胞的紧密连接功能,与紧密连接相关蛋白ZO-1的合成量减少。结论 在活化的RPE-J细胞中产生NO时,由瓜氨酸-NO循环再生的精氨酸是RPE-J细胞中产生NO的底物精氨酸的主要来源;NO对RPE-J细胞的紧密连接起破坏作用。

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