摘要：目的从分子水平探讨肌醇5’磷酸酶（SHIP）基因突变对人白血病细胞系K562细胞周期及其相关基因表达的影响。方法应用携带野生型和突变型SHIP及绿色荧光蛋白的慢病毒及空载体慢病毒质粒转染K562细胞，通过流式细胞术检测K562／SHIP细胞转染效率、细胞增殖指数及细胞周期变化；MTT法检测细胞增殖活性改变，实时荧光定量PCR（FQ—PCR）检测SHIPmRNA水平变化，Western blot检测各组K562细胞SHIP、细胞周期蛋白（cyclin）D1、p21^WAF1/CIPI、p27^KIP1蛋白表达水平及Akt磷酸化变化。结果野生型SHIP基因能明显抑制K562细胞增殖，并产生明显的G0／G1期阻滞[G0／G1期细胞分别为（34．2±7．8）％和（0．7±8．3）％，P〈0．01]；但SHIP基因点突变并未影响K562细胞增殖及细胞周期改变[G0／G1期细胞分别为（33．4±4．2）％和（36．3±6．7）％，P〉0．05]。Westernblot结果发现转染野生型SHIP基因后K562细胞Akt磷酸化和cyclin D1表达水平明显下降（P〈0．01），p21^WAF1/CIPI、p27^KIP1表达增高，而突变型SHIP基因对Akt磷酸化水平和细胞周期蛋白表达几乎没有影响（P〉0．05）。结论①野生型SHIP基因通过下调K562细胞Akt磷酸化水平，进而抑制其下游cyclinD1表达，上调p21^WAF1/CIPI和p27^KIP1基因表达，导致细胞周期阻滞在G0／G1期，抑制K562细胞增殖；②SHIP基因突变体（TTC→CTC，Phe→Leu）丧失了对K562细胞的增殖抑制作用，提示SHIP基因对K562细胞增殖的负调控作用有赖于其基因结构和功能正常。

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