摘要：目的探讨靶向干扰IER3IP1基因对K562细胞增殖和红系分化的影响。方法针对IER3IP1基因设计并构建小发夹状（shRNA）真核表达载体，转染K562细胞后用RT—PCR方法鉴定沉默效果。采用MTT实验、联苯胺染色、光镜和电镜观察、流式细胞术以及RT—PCR，观察抑制IER3IP1基因表达后对1（562细胞的影响；采用0．2μmol／L伊马替尼诱导K562细胞2d，观察诱导分化过程中IER3IP1基因表达变化情况，抑制IER3IPl基因表达后对红系分化相关基因Gfi—1B、GPA和γ—globin以及细胞表面GPA蛋白表达的影响。结果成功构建针对IER3IP1基因的shRNA真核表达载体，转染至K562细胞中，该基因mRNA表达水平明显降低，抑制率达76％（P〈0．01）。与对照组细胞相比，K562-shRNA—IER3IP1组bcr—ablmRNA表达升高（P〈0．05）；MTT检测结果显示细胞增殖能力增强（P〈0．01）；流式细胞术检测结果显示S期细胞比例增加，G0／G1期细胞比例减少（P〈0．05）；电镜可见细胞常染色质增加、异染色质减少，内质网部分扩张，囊泡样结构滞留。0．2μmol／L伊马替尼作用48h后，K562-shRNA—IER3IP1组联苯胺染色阳性率由作用前的（44．7±2．5）％降低至（22．7±1．5）％（P〈0．01），且红系分化相关基因Gfi-1B、GPA和γ—globin的mRNA表达水平明显降低，细胞表面GPA蛋白表达水平降低。同时伊马替尼作用过程中IER3IP1基因在作用3h时表达明显升高，6h时降低，12～48h表达水平基本不变。结论干扰IER3IP1基因表达后，K562细胞增殖加快，红系分化过程受阻，提示该基因可能在K562细胞增殖和向红系分化过程中发挥作用。

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