首页 期刊 中华微生物学和免疫学 6A8α-甘露糖甘酶表达抑制使Jurkat细胞间的黏附性增强 【正文】

6A8α-甘露糖甘酶表达抑制使Jurkat细胞间的黏附性增强

作者:曲莉; 向志光; 史耕先; 刘音; 崔巍; 杨海鹏; 朱立平 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学系; 北京大学首钢医院检验科
表达抑制   jurkat细胞   黏附性   生物学   糖基化  

摘要:目的 探讨6A8α-甘露糖苷酶表达抑制对人T淋巴母细胞Judua生物学行为的影响。方法 采用反义核酸技术抑制细胞中6A8α-甘露糖苷酶的表达。用PCR检测转导基因在基因组中的整合。用单抗6A8作探针,Westem印迹和免疫荧光染色流式细胞术检测细胞中6A8α-甘露糖苷酶的表达状况。用Con A结合试验检测细胞蛋白质的糖基化改变。普通光学显微镜观察细胞的形态。用DNA芯片技术分析AS细胞和M细胞mRNA表达的差异。用RT-PCR和免疫荧光染色流式细胞术验证基因芯片结果的可靠性。结果 制备了6A8α-甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat细胞(AS)。与对照细胞(野生型细胞W和转导空载体的细胞M)相比,AS细胞在培养中黏附成大团块。DNA芯片分析见与M细胞相比,AS细胞中有19个基因的表达上调,加个基因的表达下调。上调的基因中有一些与细胞间黏附相关,如CD54、CD11a、CD24、CD82、整合紊αX、整合紊α7、整合素αE、IL-1R、IL-2Rγ和TNFSF9。RT-PCR肯定了DNA芯片分析的可靠性。免疫荧光染色流式细胞术进一步肯定了CD54和CD11a在AS细胞表达的上调。结论 6A8α-甘露糖苷酶表达抑制使Judua细胞间黏附增强,CD54和CD11a等黏附分子表达的增高可能与此相关。

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