摘要:目的研究SARS-CoV的大量培养和灭活方法,为制备马抗SARS免疫球蛋白制剂提供安全的病毒.方法使用SARS-CoV感染Vero、Vero-E6和2BS细胞株,筛选对SARS-CoV较敏感的细胞株和最佳病毒感染量;在25℃、33℃和37℃培养条件下,检测SARS-CoV的最适培养温度.在室温下,使用1:2 000~1:20 000的β-丙内酯浓度灭活SARS-CoV,观察最佳灭活时间和效果.结果SARS-CoV对Vero和Vero-E6细胞株比较敏感.在37℃、5%CO2孵箱中培养72 h,细胞病变达75%以上.1:4 000的β-丙内酯能够完全灭活SARS-CoV.将灭活后的病毒液在2℃~8℃作用16 h,37℃水浴2 h能够完全使β-丙内酯的毒性水解.结论用Vero或Vero-E6细胞培养SARS-CoV,在37℃、5%CO2孵箱中培养72 h,病毒滴度最高.用1:4 000的β-丙内酯浓度加入病毒液中,作用1 h能够完全灭活SARS-CoV.
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