首页 期刊 重庆医学 转染正常c-CBL基因后耐药GIST体外药物敏感实验研究 【正文】

转染正常c-CBL基因后耐药GIST体外药物敏感实验研究

作者:杨平; 陈博; 贾贵清; 伍晓汀; 张祥运; 李卫 四川省医学科学院/四川省人民医院城东病区胃肠外科; 成都610110; 安徽医科大学第一附属医院胃肠外科; 合肥246400; 四川省医学科学院/四川省人民医院胃肠外科; 成都610072; 四川大学华西临床医学院/华西医院胃肠外科; 成都610041
胃肠道间质瘤   耐药   药物敏感  

摘要:目的研究转染正常c-CBL基因后耐药胃肠道间质瘤(GIST)细胞在体外对甲磺酸伊马替尼作用的影响。方法选择的瘤源细胞来自1例29岁青年男性患者,诊断为小肠间质瘤复发伴腹腔转移。通过细胞爬片、Western blot、RT-PCR检测基因鉴定细胞。通过将携带正常c-CBL基因的反转录病毒载体转染耐药GIST细胞中,四唑盐比色法(MTT)测定转染前后耐药GIST细胞对甲磺酸伊马替尼药物敏感性。结果 Western Blot检测培养耐药GIST的C-kit稳定表达C-kit蛋白,基因测序显示耐药GIST细胞C-kit突变位点位于第9号外显子,通过检测显示培养耐药GIST保持了原有的生物学特性。甲磺酸伊马替尼对GIST细胞作用72h MTT实验结果显示:转染前耐药细胞在1.6μmol/L浓度时,抑制率未超过50%;然而转然后,在0.10μmol/L浓度抑制率达到76.5%,最佳浓度为0.10~0.20μmol/L,转染前后不同浓度的抑制率差异有统计学意义(P〈0.01)。结论通过转染正常c-CBL至耐药GIST细胞,增强了对甲磺酸伊马替尼的敏感性。

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