首页 期刊 中国医科大学学报 MYCT1-GST原核表达载体的构建及鉴定 【正文】

MYCT1-GST原核表达载体的构建及鉴定

作者:孙媛媛; 刘佳; 富伟能 中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室; 沈阳110122; 中国医科大学实验动物部; 沈阳110001
myct1   gst   相互作用蛋白  

摘要:目的构建MYCT1-GST原核表达载体,并纯化MYCT1-GST融合蛋白。方法以正常人外周血c DNA为模板,PCR方法扩增该基因的开放阅读框,定向克隆至pET28a(+)载体后送测序鉴定。将构建好的MYCT1-GST表达载体转化至BL21(DE3)菌株,通过IPTG诱导表达,PCR结合测序方法鉴定载体构建是否成功,Western blotting方法鉴定MYCT1-GST融合蛋白的表达。结果测序结果证实成功将MYCT1的开放阅读框克隆至pET28a(+)表达载体,经诱导后成功纯化了MYCT1-GST融合蛋白。结论成功构建MYCT1-GST表达载体,为进一步研究MYCT1相互作用蛋白质奠定了基础。

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