摘要：目的：探讨大黄素（EM）在转化生长因子-β1（TGF-β1）刺激的人肾小管上皮细胞（HK-2）纤维化相关蛋白表达的机制。方法：HK-2细胞随机分为正常对照组、TGF-β1刺激的模型对照组和大黄素（TGF-β1＋EM）组。采用ELISA法检测培养细胞上清液中CollageⅠ和Fibronectin的含量。TGF-β1刺激HK-2细胞24 h后收集细胞用于免疫荧光、免疫印迹Western Blot和实时荧光定量PCR（RT-PCR）分析。Western Blot印迹法分别检测Ak/TOR通路蛋白PI3K、p-Akt和mTOR的表达; RTPCR法分别检测Ak/TOR通路蛋白PI3K、p-Akt和mTOR mRNA的表达;免疫荧光检测PI3K在HK-2细胞模型中的表达。结果：与模型对照组相比,大黄素组细胞培养液上清中CollageⅠ和Fibronectin的含量明显减少（P 〈0. 05）;抑制PI3K蛋白表达水平增加,降低其下游p-Akt蛋白表达,进而降低下游mTOR蛋白表达,差异有统计学意义（P 〈0. 05）; PI3K、p-Akt和mTOR mRNA的表达水平降低,差异有统计学意义（P 〈0. 05）; PI3K荧光表达减少。结论：大黄素干预TGF-β1诱导的HK-2细胞纤维化模型后,可以通过抑制自噬经典Ak/TOR通路,对细胞损伤有缓解作用,为进一步探索其机制奠定基础。

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