首页 期刊 中国兽医 三重荧光PCR检测食源性致病菌方法的建立与初步应用 【正文】

三重荧光PCR检测食源性致病菌方法的建立与初步应用

作者:谢海燕; 蔡奕琪; 张端秀; 徐振娜; 洪伟彬 东莞市动物疫病预防控制中心; 广东东莞523086
大肠杆菌o157   志贺氏肠杆菌   单增李斯特杆菌   三重荧光pcr   方法建立  

摘要:根据大肠杆菌O157的rfbE基因、志贺肠杆菌ipaH基因、单增李斯特杆菌hlyA基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度、特异性和重复性,建立了可同时检测上述3种食源性致病菌的多重实时荧光PCR方法。试验结果显示,该方法对大肠杆菌O157、志贺肠杆菌、单增李斯特杆菌进行3联扩增的相对灵敏度检测限分别为5×10^2、5×10^2和5×10^3CFU/mL;对10株标准/参考菌株的检测结果,只有目的菌株呈阳性反应;用该方法检测26份冻肉样品,与传统的细菌分离鉴定法结果一致,说明研究建立的方法是鉴定3种食源性致病菌的有效方法。

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