摘要：目的评价吉西他滨(GEM)、紫杉醇(TAX)时序联合抗膀胱癌细胞系效应.方法MTT法检测GEM与TAX同时(A组)、先后间隔24 h时序(B组为GEM先于TAX 24 h,C组为TAX先于GEM 24 h)联合用药对膀胱癌细胞系5637和EJ细胞的细胞毒活性,Chou和Talalay方法评估两药物作用关系;流式细胞仪碘化丙啶法检测药物作用细胞后的细胞周期分布变化;Annexin-V检测各组细胞凋亡率的变化;蛋白印迹法检测细胞周期CyclinD1和CyclinB1蛋白的变化.结果药物浓度为1.0μg/ml时,A组5637、EJ细胞生长抑制率为38%、40%,细胞凋亡率为29.3%、15.4%,细胞毒联合指数(CI)均＜1;C组5637、EJ细胞生长抑制率为15%、13%,细胞凋亡率为11.5%、6.7%,CI均＞1;B组结果与A组相仿.给药第48 h细胞周期分布显示细胞B组主峰在G1期积聚(60%),A组G1、G2/M期略有增加,C组主峰在G2/M期积聚(≥65%).A组CyclinD1蛋白表达较无药物对照组下降,CyclinB1表达上调.结论联合应用GEM和TAX治疗膀胱癌,存在时序效应,即同时用药产生协同作用,先用GEM,后用TAX也可产生较好的细胞毒效应,而先用TAX,后用GEM,则产生拮抗作用.

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