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阿仑膦酸钠联合骨化三醇对成骨细胞的调节及对OPG/RANKL蛋白表达的影响

作者:杨明; 陈剑; 陈意磊; 马建军; 张建锋; 万双林 浙江大学医学院附属邵逸夫医院骨科
阿仑膦酸钠   骨化三醇   成骨细胞   opg   rankl  

摘要:目的探讨阿仑膦酸钠联合骨化三醇对成骨细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性、细胞增殖及OPG/RANKL蛋白表达的影响。方法以骨髓间充质干细胞诱导分化成骨细胞,获得成骨细胞后分别加入不同浓度阿仑膦酸钠(1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4 mmol/L)与骨化三醇(1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4、1×10-3、1×10-2 mmol/L),测定成骨细胞AKP活性及观察茜素红染色情况,继而确定最佳单药浓度。比较两种单药及联合用药(均选择最佳单药浓度)对成骨细胞AKP活性、细胞增殖及OPG/RANKL蛋白表达的影响。多组间AKP活性的比较采用方差分析,进一两组间的比较采用q检验,率的比较采用χ2检验。结果成骨细胞诱导分化成功。阿仑膦酸钠与骨化三醇的最佳单药浓度分别为1×10-6mmol/L、1×10-4 mmol/L。相对于无药物处理的成骨细胞组,各药物处理组差异明显,其中阿仑膦酸钠+骨化三醇的联合用药组成骨细胞AKP活性最强、钙结节形成最多、细胞增殖最明显,其次为骨化三醇单药组,再次为阿仑膦酸钠组;另外,单纯成骨细胞诱导组及联合用药组的OPG蛋白表达均明显升高、RANKL蛋白表达明显降低,而且联合用药组较单纯成骨细胞诱导组OPG蛋白的升高水平更显著、RANKL蛋白的下降水平更显著。结论阿仑膦酸钠联合骨化三醇具有显著的调节成骨细胞AKP活性、钙结节形成、细胞增殖及OPG/RANKL蛋白表达的作用。

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