摘要：目的克隆表达重组人Ⅰ型丙氨酸氨基转移酶(ALT1)蛋白及制备抗血清，探讨建立ALT1特异性检测方法思路。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增人ALT1 cDNA，插入pGEX-2T，构建原核表达载体pGEX-2T—ALT1，并转人大肠杆菌进行表达。SDS-PAGE，活力测定和活性染色鉴定表达产物。表达产物免疫小鼠所得抗血清对天然ALT1，重组ALT1及重组ALT2进行Western blot分析。结果重组质粒测序和酶切结果显示ALT1基因已经成功克隆到pGEX-2T载体。SDS-PAGE和活性染色表明所表达蛋白具有天然活性。抗ALT1血清除识别重组ALT1外，还可识别天然蛋白和重组ALT2。结论重组人ALT1得到高效可溶性表达。用目前方法制备的抗血清特异性不高，如建立ALT1的免疫学检测方法需要采用特异性识别ALT1的抗体，以避免交叉反应引起的假性升高。

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