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突变受阻性扩增系统快速检测结核分枝杆菌对利福平耐药性的初步研究

作者:范小勇; 胡忠义; 徐帆洪; 陈延; 郭盛淇; 李忠明 200052; 上海生物制品研究所分子生物实验室; 上海市肺科医院; 美国胜美生物科技公司
突变受阻性扩增系统   快速检测   结核分枝杆菌   利福平   耐药性  

摘要:利福平(RFP)是结核化疗方案中的一个关键药物,它的应用可明显缩短结核病的疗程.因此,创建快速、简便的检测方法一直是基础研究中的一个重要课题.突变受阻性扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS)[1]是一种可以检测任何已知点突变或小基因片段缺失的扩增技术,简便、可靠、无同位素污染.我们选择与结核分枝杆菌(结核菌)RFP耐药相关的rpoB基因中突变频率最高的3种突变形式:531 TCG→TTG,526 CAC→TAC,516 GAC→GTC来设计ARMS特异性突变引物,ARMS-聚合酶链反应(PCR)扩增后结合微孔板探针杂交酶免疫技术(EIA)加以检测其扩增产物,进而推断其RFP耐药与否.

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