摘要:目的探讨N-乙酰半胱氨酸对新生小鼠肝细胞内毒素损伤时的保护作用,为新生小鼠内毒素肝损伤的防治研究提供理论依据。方法采用胶原酶消化组织块法分离新生小鼠的肝细胞,将细胞分内毒素处理组(LPS组)及N-乙酰半胱氨酸预处理组(NAC组)。LPS组培养基中加入LPS 10μg/ml;NAC组先在培养基中加入N-乙酰半胱氨酸5mmol/L,孵育1h后再加入LPS 10μg/ml。分别于加入LPS 0、6和12h收集各组肝细胞上清和肝细胞,每组12例,以生化法检测培养上清的丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和一氧化氮(nitric oxide,NO)的水平,并以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组细胞诱导型一氧化氮合成酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)mRNA的表达。结果LPS组在0、6、12h的ALT值分别为(21.1±4.78)U/L、(59.8±8.59)U/L、(89.6±15.30)U/L,NO水平分别为(1.6±0.31)μmol/L、(6.6±0.81)μmol/L、(7.8±1.01)μmol/L,iNOS mRNA水平分别为0.17±0.023、0.71±0.091、0.71±0.097。LPS组的ALT和NO、iNOS mRNA水平在6、12h较0h明显升高,差异有极显著统计学意义(P〈0.01);NAC组上清中ALT和NO水平在0、6、12h分别为(20.6±5.98)U/L、(40.8±7.30)U/L、(55.4±5.48)U/L和(1.7±0.26)μmol/L、(3.2±0.71)μmol/L、(4.0±0.71)μmol/L,肝细胞iNOS mRNA的表达水平在0、6、12h分别为0.18±0.026、0.41±0.060、0.40±0.067。经NAC预处理后,在6、12h上清中ALT的水平与LPS组比较明显降低,而且NO水平以及肝细胞iNOS mRNA的表达与LPS组比较也明显降低,差异均有极显著统计学意义(P〈0.01)。结论NAC对新生小鼠肝细胞内毒素损伤有保护作用,NAC可能通过抑制LPS激活iNOS而发挥保护作用。
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