首页 期刊 中国组织工程研究 建立兔脊髓缺血再灌注损伤模型PDIA3的表达变化及临床意义 【正文】

建立兔脊髓缺血再灌注损伤模型PDIA3的表达变化及临床意义

作者:李春旭; 张善勇; 齐治平; 夏鹏; 潘肃; 昝春芳; 杨小玉 吉林大学第二医院骨科; 吉林省长春市130041
脊髓   缺血   再灌注损伤   蛋白质二硫键异构酶   组织构建  

摘要:背景:目前认为脊髓缺血再灌注损伤是造成脊髓减压手术后"二次瘫痪"的主要原因,而控制应激相关蛋白和兴奋性氨基酸对脊髓缺血再灌注损伤的治疗至关重要。目的:观察蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)在兔脊髓缺血再灌注损伤后表达变化。方法:依据Zivin法建立兔脊髓缺血再灌注损伤模型,将36只新西兰白兔随机均分成6组,对照组只显露腹主动脉而不阻断血流,30 min后关闭腹腔;实验组阻断腹主动脉血流30 min后分别再灌注0,6,12,24,48 h再关闭腹腔。首先均利用改良Tarlov评分进行运动功能评价;随后取损伤段腰髓(L3-L5),结合荧光差异双向凝胶电泳和质谱分析筛选出PDIA3;其次应用免疫印迹印证质谱;最后通过免疫组织化学结果观察其在脊髓内的时间和空间表达变化特点。结果与结论:(1)运动功能评分结果:实验动物于脊髓缺血再灌注损伤发生后均可见后肢功能逐渐好转现象,评分结果为缺血再灌注24 h达最高水平,48 h又略有下降;(2)免疫印迹结果:对照组PDIA3表达有清晰印迹显示,缺血再灌注0 h印迹轻度增强,6-12 h进一步增强,24 h显著减弱至最低水平,48 h再次升高到6-12 h水平;(3)免疫组织化学结果:神经元胞浆中可见PDIA3表达,且中间神经元表达量明显多于运动神经元;(4)结果表明:脊髓缺血再灌注损伤发生发展过程中PDIA3异常上调,说明PDIA3与脊髓缺血再灌注损伤密切相关,可作为其诊断和治疗的新靶点。

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