首页 期刊 中国组织工程研究 内源性Nurr1对胚胎中脑及前脑前体细胞体外分化的诱导作用 【正文】

内源性Nurr1对胚胎中脑及前脑前体细胞体外分化的诱导作用

作者:李良; 赵焕英; 徐群渊 首都医科大学北京神经科学研究所,北京市神经再生修复研究重点实验室,北京市100054
细胞分化   nurrl   多巴胺神经元   酪氨酸羟化酶  

摘要:目的:多巴胺神经元的发育是人们较为关注的问题,目前发现的蛋白可能在其发育机制中起着重要作用,研究内源性Nurrl基因表达变化对体外培养大鼠胚胎神经前体细胞分化的诱导作用。方法:实验于2003-05/2004-08在首都医科大学北京神经科学研究所完成;分离13.5d大鼠胚胎中脑及前脑神经前体细胞并进行体外培养,培养基中加入视黄酸及毛喉素诱导3d,采用RT-PCR,Western Blot及免疫荧光染色的方法观察Nurrl表达的变化及细胞分化;同时,用反义寡核苷酸转染技术阻断细胞Nurrl表达后再进行诱导,并进行同样观察。结果:视黄酸及毛喉素可诱导前体细胞的Nurrl表达,增加约60%,中脑来源神经前体细胞中(tyrosine hydrixylase,TH)阳性细胞占β-tublin-Ⅲ阳性细胞的比例由原来的(5.32±1.20)%增至(9.01±3.20)%。前脑来源神经前体细胞中TH阳性细胞占β-tublin-Ⅲ阳性细胞的比例由原来的(1.27±1.20)%增至(5.01±1.50)%。Nurrl反义寡核苷酸作用12h后前体细胞的Nurrl表达被阻断,至72h后重新表达。Nurrl被阻断后,只有少量的前体细胞被诱导为TH阳性细胞。结论:内源性Nurrl的过表达可促进胚胎神经前体细胞向多巴胺能神经元分化。

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